As células assassinas induzidas por citocinas (CIK) são uma nova classe de células assassinas induzidas por citocinas (CD3AK) preparada por Schmidt-Wolf et al. em 1991, com base nas células assassinas activadas por CD3 (células assassinas activadas por anticorpos monoclonais anti-CD3, CD3AK). As células CIK são um grupo heterogéneo de células obtidas a partir de células mononucleares do sangue periférico humano (PBMC) in vitro após estimulação com uma variedade de citocinas (IFN-γ, rIL-2, CD3McAb e IL-1α, etc.), e possuem uma poderosa atividade antitumoral dos linfócitos T e características de eliminação de tumores não restritas ao MHC das células NK. Atualmente, a terapia com células CIK tem sido utilizada na investigação clínica de muitos tipos de tumores, como o cancro renal, o melanoma maligno, o cancro do cólon, o linfoma, etc., e tem alcançado determinados efeitos terapêuticos. Estudos demonstraram que, em comparação com as células assassinas activadas por linfocinas (LAK), os linfócitos de infiltração tumoral (TIL) e as células CD3AK, as células CIK têm uma velocidade de proliferação rápida, uma elevada atividade de destruição de tumores e um amplo espetro de destruição de tumores, As células CIK têm as vantagens de uma elevada velocidade de proliferação, um amplo espetro de destruição de tumores, a mesma sensibilidade a células tumorais resistentes a múltiplos fármacos, baixa citotoxicidade para as células precursoras hematopoiéticas normais da medula óssea, resistência à apoptose Fas-FasL de células efectoras desencadeada por células tumorais, e a gravidade da doença e das metástases não afecta a atividade antitumoral das células CIK, pelo que as células CIK têm uma perspetiva promissora de aplicação na imunoterapia de retransmissão de tumores. 1, a indução e as propriedades biológicas das células CIK As células efectoras das células CIK são extremamente raras no sangue periférico normal, apenas 1% a 5%. Atualmente, existem vários métodos para induzir células CIK in vitro, a principal diferença reside nas diferentes combinações de citocinas. CD3McAb e IFN-γ são os componentes necessários, CD3 McAb desempenha o papel de atividade mitogénica, que pode cruzar com o CD3 na superfície das células T e induzir a ativação celular, enquanto o IFN-γ pode induzir a síntese de citocinas como a IL-1. No processo de cultura de células CIK, a ordem de adição do fator também tem um certo efeito na sua toxicidade, o IFN-γ só pode melhorar a atividade citotóxica do CIK se for adicionado 24 horas antes da adição de IL-2 (se for adicionado ao mesmo tempo que a IL-2 ou mais tarde do que é adicionado, perde o aumento da citotoxicidade), e este efeito está relacionado com a regulação positiva do recetor de IL-2 na superfície da célula. Para além da seleção de citocinas, são habitualmente utilizadas na cultura de células CIK as seguintes citocinas: IL-2, fitohemaglutinina exógena (PHA), IL-7, IL-12, etc. As células CIK são uma população heterogénea de células, a maioria das quais tem marcadores de células T (TCRα / β 86,5% ± 5,7%, TCRγ / δ 4,5% ± 2,6%, CD4 45,4% ± 3,2%, CD8 47,7% ± 11,0%), e algumas das quais têm marcadores de células NK (CD16 10,4% ± 4,9%, CD56 28,5% ± 8,6%), e 88% dos quais têm marcadores de células NK (CD16 10,4% ± 4,9%, CD56 28,5% ± 8,6%). As células CD3+CD56+ representavam aproximadamente 1-5% das PBMC não cultivadas e podiam obter um crescimento significativo, tanto em números absolutos como relativos, após a cultura (30 d de expansão, aumento de 100 vezes do número de células e aumento de 10 vezes da população). Em relação à proporção de expansão de 10 vezes), as células CD3+CD56+ eram principalmente derivadas de células T (CD3+CD56-) em vez de células NK (CD3-CD56+) em PBMC, e verificou-se ainda que a expressão de CD56 não ocorria na subpopulação de células CD4+CD8- das células T durante a cultura, enquanto 1/4 da subpopulação CD4-CD8+, 1/3 da subpopulação CD4+CD8+ Uma vez que o rácio das duas subpopulações, CD4+CD8+ e CD4-CD8-, era pequeno em PBMC, a subpopulação de células T CD4-CD8+ era a principal fonte de células efectoras CIK. No entanto, nas células CD3+CD56+ expandidas, a expressão de CD8 não teve qualquer efeito nos seus efeitos citotóxicos. O mecanismo das células CIK O princípio da morte de células-alvo por CIK ainda não foi totalmente elucidado, e os possíveis mecanismos são os seguintes: ① Morte direta de células tumorais. Mehta et al. acreditam que existem duas maneiras de matar as células-alvo: Primeiro, as células CIK são ativadas pela estrutura de reconhecimento do antígeno-1 associado à função linfocitária (antígeno-1 associado à função linfocitária, LFA-1), resultando em citólise dependente de partículas de toxicidade citoplasmática, esta via não está relacionada à concentração de AMP cíclico (cAMP) no citoplasma; esta via não está relacionada à concentração de AMP cíclico (cAMP) no citoplasma. Esta via é independente da concentração de monofosfato de adenosina cíclico intracitoplasmático (AMPc); em segundo lugar, o recetor do tipo CD3 na superfície das células CIK liga-se ao recetor do tipo CD3 e ativa as células CIK para produzir citólise mediada por grânulos citotóxicos, que está relacionada com o nível de AMPc intracitoplasmático. ② Efeitos supressores e destruidores de tumores da grande quantidade de citocinas inflamatórias produzidas após a ativação. Um grande número de experiências provou que as células CIK em cultura podem segregar uma variedade de citocinas, tais como TNF-α, IL-2, GM-CSF, IFN-γ, etc., que não só têm um efeito inibidor direto sobre as células tumorais, mas também matam indiretamente as células tumorais através da regulação da reatividade do sistema imunitário do organismo. ③Indução da apoptose das células tumorais. As experiências de Verneris et al. sugerem que as células CIK que expressam FasL no processo de cultura podem resistir à apoptose Fas-FasL de células efetoras desencadeadas por células tumorais FasL + e podem induzir apoptose de células tumorais Fas +, exercendo assim um efeito de morte crônica nas células tumorais e garantindo a persistência a longo prazo da atividade antitumoral. Sun et al. descobriram que as células CIK induziam a morte das células tumorais na fase inicial e a necrose das células tumorais na fase tardia, regulando negativamente a expressão de p53, C-myc e Bcl-2 e regulando positivamente a expressão de Bax. ④Promover a proliferação e ativação de células T. Ren Huan et al. concluíram que o efeito anti-tumoral das células CIK in vivo pode estar relacionado com a promoção da proliferação e ativação das células T no hospedeiro. Também se especulou que as células T CD3+ CD56+ primitivas, depois de infundidas com CIK, se transformaram em células T citotóxicas (linfócitos T citotóxicos (CTL)) com atividade de destruição de tumores sob o estado do organismo hospedeiro ou a estimulação de antigénios tumorais, e desempenharam um papel antitumoral.