A artrite reumatóide é uma condição clínica comum. O autor acredita que a principal patogénese na medicina chinesa durante a fase activa da AR é a paralisia das articulações por calor húmido e mal tóxico, e a aplicação clínica de Ermiao San é eficaz. Neste artigo, utilizámos o modelo animal AA para observar o efeito anti-inflamatório de diferentes formulações de Ermiao San, e fornecer a base para a sua aplicação clínica e mecanismo de acção em experiências com animais.
1. materiais e métodos
1.1 Animais e agrupamento de noventa fêmeas de 8 semanas de idade, ratos istar W, com peso (150±20) g, classe SPF, foram adquiridos no Centro Animal Experimental da Universidade de Medicina Tradicional Chinesa de Shandong, número de licença animal: SCXK(LU)20111118. Cangzhi 2 Huangbai 1, grupo Cangzhi, grupo Huangbai, e grupo combinado de decocção única Huangbai Cangzhi, todos com quantidades iguais de água destilada e alimentados com comida normal.
1.2 Drogas e reagentes Ermiao San foi composta por Atractylodes cantonensis e Phellodendron cantonensis. Foram uniformemente equipados pela sala de preparação do nosso hospital e foram misturados numa concentração de droga bruta de 0,64g/mL, 0,43g/mL, 0,43g/mL, 0,32g/mL, 0,32g/mL e 0,64g/mL respectivamente. Comprimidos de polissacarídeo Leigongtang: fabricados pela Huangshi Feiyun Pharmaceutical Co., Ltd. com uma especificação de dose de 10mg/tabela. Os reagentes experimentais são o adjuvante completo de Freund, interleucina 1 (IL-1), interleucina 4 (IL-4), interleucina 6 (IL-6) e factor de necrose tumoral alfa (TNF-α).
2. modelização e administração de drogas
Com excepção do grupo em branco, todos os grupos de ratos foram injectados com 0,1ml de subcutâneo completo de Freund no dedo traseiro direito.
A dose diária foi calculada de acordo com a concentração do medicamento em bruto.
Com excepção do grupo em branco, todos os ratos receberam diariamente a droga por gavagem até ao dia anterior ao final da experiência, durante um total de 22 dias.
3. itens de teste experimental
(1) Medida do inchaço das articulações No dia da moldagem e a cada 3 dias após a moldagem, a espessura do membro inferior médio e posterior 1/3 do membro inferior direito dos ratos foi medida com paquímetros de Vernier, e cada rato foi medido duas vezes.
(2) Exame de amostras de soro No final da fase de administração do medicamento, os animais foram anestesiados com 2% de sódio pentobarbital por injecção intraperitoneal, e o sangue foi retirado da veia cava inferior por dissecação, centrifugado e o soro foi obtido dos kits IL-1, IL-4, IL-6 e TNF-α, e espicaçado para ensaio.
(3) Exame anatomopatológico conjunto Dois ratos foram retirados de cada grupo e secções patológicas de rotina da cápsula articular do joelho direito foram enviados para exame.
4. resultados experimentais
(1) Inchaço do pé e plantar de cada grupo de ratos
No dia da moldagem, todos os ratos de cada grupo mostraram um inchaço óbvio no local de injecção do pé traseiro direito e plantar. Depois disso, o inchaço do local de injecção de todos os ratos atingiu o seu pico dentro de 4-7 dias. Com cerca de uma semana, a maioria dos ratos começou a mostrar inchaço na articulação do joelho esquerdo. Em duas semanas, o inchaço na articulação do joelho esquerdo tendeu a estabilizar-se. À medida que o número de dias de dosagem aumentava, o inchaço do joelho esquerdo em alguns ratos diminuía em graus variáveis, e em muito poucos ratos, o inchaço do joelho esquerdo desaparecia antes de o espécime ser cortado. Os valores detalhados das medidas de inchaço e pós-doseamento são mostrados no Quadro 1.
Quadro 1 Efeito no inchaço do pé traseiro direito e metatarso (mm)
Grupo
Dias
Grupo em branco
Grupo modelo
Grupo de controlo
Atractylodes macrocephala 1
Cyperus rotundus 1
Atractylodes macrocephala 1
Phellodendron 2
Atractylodis Macrocephala 2
Atractylodes flavus 1
Grupo de Atractylodes
Grupo Phellodendron
Grupo combinado de decocção única
0
3.93±0.27
4.09±0.40
3.85±0.46
4.07±0.58
4.29±0.31
4.43±0.32
4.32±0.16
4.08±0.49
4.36±0.59
1
3.96±0.30
7.38±0..40
7.45±0.46
7.26±0.39
7.29±0.52
7.62±0.47
7.60±0.55
7.57±0.27
7.35±0.15
4
4.02±0.46
7.99±0.65
8.22±0.54
8.02±0.57○
7.96±0.59○
8.15±0.67○
7.88±0.45○
7.74±0.52○
7.92±0.32○
7
3.94±0.33
7.90±0.39
8.31±0.24
7.95±0.55○
8.05±0.49○
8.21±0.67○
7.92±0.60○
7.83±0.48○
7.98±0.45○
10
3.92±0.40
7.87±0.40
8.26±0.30
7.68±0.45○
7.98±0.40○
8.12±0.56○
7..88±0.56○
7.75±0.48○
7.87±0.43○
13
3.95±0.41
7..78±0.42
8.12±0.33
7.49±0.42○
7.76±0.41○
7.98±0.45○
7.72±0.48○
7.62±0.34○
7.62±0.38○
16
3.93±0.35
7.69±0.38
7.98±0.42
7.26±0.35○
7.59±0.39○
7.82±0.40○
7.60±0.36○
7.58±0.43○
7.52±0.33○
19
3.95±0.40
7.60±0.41
7.82±0.35
7.02±0.45○
7.45±0.36○
7.69±0.30○
7.50±0.46○
7.49±0.37○
7.29±0.45○
22
3.94±0.35
7.56±0.42
7.70±0.42
6.80±0.36○
7.36±0.42○
7.59±0.46○
7.41±0.35○
7.38±0.42○
7.12±0.38○
Nota: Análise por teste t, P<0,05 para todos os grupos de medicamentos em comparação com o grupo modelo e ○P<0,05 para o grupo de fitoterapia chinesa em comparação com o grupo de controlo.
Como se pode ver no Quadro 1, após a administração da droga, o inchaço do pé e plantar dos ratos em todos os grupos pareceu ser gradualmente aliviado por volta da 2ª semana, sugerindo que tanto a droga chinesa como a ocidental tinham um efeito inibidor sobre a inflamação do pé e plantar dos ratos, e houve significância estatística (P<0,05) na comparação de todos os grupos de medicamentos com o grupo modelo. Ao mesmo tempo, houve significado estatístico (p<0,05) na comparação entre os diferentes grupos de preparação e os grupos de ervas individuais de Ermiao San e o grupo de controlo. Houve também uma diferença estatisticamente significativa entre o grupo de equivalentes de medicina herbal chinesa e todos os outros grupos (p<0,05). Pode-se ver que, em termos do grau de alívio do inchaço articular, o grupo Cangzhu1Huangbai1 teve o melhor efeito de tratamento. < span="">
(2) Efeito dos fármacos nas citocinas inflamatórias
Os resultados dos efeitos das drogas chinesas e ocidentais nas citocinas inflamatórias do soro em ratos são detalhados no Quadro 2.
Quadro 2 Efeito dos fármacos nas citocinas inflamatórias do soro
Cytokine
Grupo
IL-1β
IL-4
IL-6
TNF-α
Grupo em branco
54.01±13.19
307.04±12.48
59.64±8.39
1.19±0.25
Grupo modelo
112.55±10.54
41.36±4.15
68.31±6.72
1.95±0.05
Grupo de controlo
85.90±13.89○
115.64±12.18
62.03±5.44
1.75±0.09
Atractylodis Macrocephalae 1 Huangbai 1
69.29±10.90○
170.40±10.76○
38.69±8.97□
1.23±0.12○
Atractylodes1Huang Cai2
79.39±1229○
139.09±10.61○
49.60±5.02□
1.42±0.25○
Atractylodes 2 Fhelodendron 1
76.64±15.89○
140.26±9.18○
45.88±8.43□
1.47±0.05○
Grupo de Atractylodes
87.56±9.32
123.66±15.23
46.26±9.33□
1.60±0.38
Grupo Cyperus rotundus
90.78±13.56
130.55±13.56
51.69±5.43
1.58±0.24
Grupo combinado de decocção única
86.34±12.75
125.36±15.33
56.59±4.29
1.56±0.08
Nota: P<0.01 para todos os grupos de medicamentos em comparação com o grupo modelo por análise de teste t; ○P<0.05 e □P<0.01 para o grupo de fitoterapia chinesa em comparação com o grupo de controlo.< span="">
Como se pode ver na Tabela 2, IL-1β, IL-6 e TNF-α, que podem reflectir a gravidade da inflamação, foram as mais elevadas no grupo modelo, e IL-4, uma citocina que reflecte a inibição da inflamação, foi a mais baixa no grupo modelo, todas elas estatisticamente significativas quando comparadas com o grupo em branco (P<0,01). Os efeitos das diferentes doses de Ermiao San sobre as citocinas do soro foram estatisticamente significativos (p<0,01) quando comparados com o grupo modelo, e também estatisticamente significativos (p<0,01) quando comparados com o grupo de controlo, incluindo il-1, il-4, tnf-α (p<0,05), e il-6 (p<0,01), demonstrando plenamente a eficácia das diferentes doses de Ermiao San em comparação com o grupo de controlo. O grupo < span="">Cangzhu 1 Huangbai 1 foi estatisticamente significativo (p<0,05) quando comparado com cada um dos outros grupos de medicamentos, indicando que a relação 1:1 da fórmula original de Ermiao San era a mais eficaz. < span="">
(3) Efeito dos fármacos nas secções de patologia articular
Grupo em branco: Ocasionalmente foram encontradas pequenas quantidades de tecido conjuntivo fibroso e ocasionalmente células inflamatórias crónicas na cavidade articular excisada, e não houve congestão ou edema na cápsula articular.
No grupo modelo, houve uma marcada proliferação de tecido fibroso e uma grande infiltração de células inflamatórias crónicas na cavidade articular excisada, com tecido de granulação marcada e formação típica de folículos linfóides. (ver figura 1 para ilustração)
Em cada grupo de medicamentos: a patologia na cavidade articular foi significativamente alterada em comparação com o grupo modelo. A hiperplasia do tecido fibroso era menos grave do que no grupo modelo, o número de células inflamatórias crónicas era significativamente reduzido, e o congestionamento e edema eram significativamente menos graves do que no grupo modelo. Os diferentes grupos de Ermiao San eram significativamente melhores do que o grupo de controlo, o grupo de decocção de ervas e o grupo de mistura de monómeros. Isto indica que a eficácia anti-inflamatória dos vários grupos de preparação de Ermiao San foi melhor, especialmente a melhor eficácia da fórmula original na proporção de 1:1. (Ver figuras 2, 3 e 4 para ilustração)
Os resultados são mostrados em: secções patológicas sob microscopia ligeira (como mostrado nas Figuras 1, 2, 3 e 4).
Figura 1 (grupo modelo x 100) Figura 2 (grupo de controlo x 100)
Fig. 3 (Atractylodes1Huangbao1 grupo×100) Fig. 4 (Atractylodes grupo×100)
5. discussão
RA pertence à medicina chinesa “paralisia por calor”, “Dong bath wu jie hug 1 Jing” animal gagging Jing” oh honestamente pingando ténis de cozinha Jing Jing questionáveis (6) bordas de acordo com a taxa de janja entusiasticamente escândio questionável detenção amonia zai garfo confundido com a parede da taça de saia µ塚任饕±硪 [1].
A medicina moderna descobriu que a IL-1 e a TNF-α são citocinas que desempenham um papel importante na patogénese da AR e podem levar à destruição progressiva das articulações, para além da inflamação sinovial [2]. Foi demonstrado que a redução da IL-1 e TNFα está estreitamente relacionada com a melhoria da actividade clínica (indicadores clínicos e laboratoriais) [3]. O efeito anti-inflamatório da IL-4 reflecte-se principalmente na regulação da actividade de muitos tipos diferentes de células na AR, inibindo assim a actividade de TNF-α, IL-1, IL-6 e IL-8, inibindo a síntese de NO e a produção de PGE2, controlando assim a inflamação A utilização destas células é também conhecida por proteger a integridade da cartilagem articular e osso subarticular e outros tecidos articulares. Existe uma visão crescente de que a inibição das actividades dos factores inflamatórios TNF-α, IL-1, IL-6, IL-8, etc., e a upregulação das actividades dos factores anti-inflamatórios IL-4 e IL-10 a nível celular e molecular podem fornecer novas pistas para a estratégia de tratamento da AR.
O segredo da medicina chinesa reside na dosagem, e os efeitos das diferentes proporções podem variar muito. Neste estudo, descobrimos que os efeitos das diferentes proporções de Ermusan diferiam em tamanho, e a proporção de 1:1 entre Atractylodes macrocephala e Phellodendron chinensis foi a mais eficaz em reduzir o inchaço nos dedos inflamatórios dos ratos e em afectar as citocinas inflamatórias do soro.