A gonorreia é o principal tipo de DST prevalecente no país. Embora o aumento do número de casos de outras DST tenha reduzido a proporção de gonorreia no número global de doentes com DST de 65,2% em 1991 para 33,3% em 2000, o número total de doentes com gonorreia aumentou de 114.000 para 286.000, e a taxa de incidência também aumentou de 10,09/100.000 para 22,92/100.000.
I. Situação actual da resistência gonocócica aos medicamentos
Os antibióticos ainda são os principais medicamentos utilizados no tratamento da gonorreia, mas como o mercado médico para o tratamento de doenças venéreas na China é muito pouco regulamentado, o número de estirpes resistentes aos medicamentos de gonococos aumentou, por exemplo, as estirpes resistentes de gonococos à penicilina atingiram 68,3%, e as estirpes resistentes de tetraciclina atingiram 92,6%, pelo que estes dois medicamentos foram retirados do plano de tratamento da gonorreia. A ciprofloxacina, uma das quinolonas, só tem sido utilizada no tratamento da gonorreia nos últimos anos, mas a proporção de estirpes resistentes tem aumentado rapidamente. O Grupo Colaborativo de Monitorização da Resistência aos Medicamentos Gonocócica do Centro Nacional de Controlo da Lepra das DST relatou que durante os seis anos de 1995 a 2000, o número de estirpes resistentes de gonococos a ciprofloxacina foi de 15,5%, 13,5%, 28,5%, 52,3%, 78,2% e 85,2% respectivamente. Das 4188 estirpes gonocócicas testadas, 2232 estirpes (53,3%) eram resistentes à ciprofloxacina. Foram também encontrados muitos casos clínicos de falha no tratamento da gonorreia com ciprofloxacina.
II. o problema da resistência gonocócica aos medicamentos
Cada vez mais bactérias encontradas na clínica são resistentes aos medicamentos, pelo que cada vez mais antibióticos não funcionam. A razão para isto é que os genes das bactérias mudaram, e há muitas formas de mudar, e quanto mais simples for o organismo, mais fácil é a sua mutação.
1. antibióticos comummente utilizados
De acordo com a sua estrutura química, os antibióticos comummente utilizados podem ser divididos em: β-lactams, aminoglicosídeos, macrólidos, poliénios, tetraciclinas, sulfonamidas, quinolonas e assim por diante.
Os medicamentos antibacterianos inibem ou matam microorganismos principalmente através de cinco locais de acção: 1. Inibir a síntese da parede celular bacteriana, os medicamentos com toxicidade selectiva para as bactérias são β-lactams (penicilinas, cefalosporinas, carbapenems), glicopeptídeos (vancomicina, teicoplanina); 2. Inibir a síntese de proteínas bacterianas, os medicamentos com toxicidade selectiva são macrólidos, tetraciclinas, cloranfenicol Inibir a síntese do ácido fólico, drogas selectivas tais como sulfonamidas, metotrexato; 4. afectar o metabolismo do ácido nucleico, drogas tais como quinolonas, rifampicina, metronidazol, toxicidade selectiva é pobre; 5. destruir a estrutura da membrana celular, drogas tais como anfotericina B, polimixina, toxicidade selectiva é pobre.
2, a classificação da resistência aos medicamentos gonocócicos
Resistência genética (resistência natural): resistência cromossómica (mediada por cromossomas), resistência extracromossómica (mediada por plasmídeos)
(mediada por plasmídeos) e resistência não genética (resistência adquirida): maioritariamente mediada por plasmídeos.
3. modo de transmissão da resistência aos medicamentos gonocócicos
Existem várias formas de transmissão de genes mediados por plasmídeos e cromossomas de uma bactéria para outra em gonococos.
(1) transformação (transdução).
Isto refere-se à entrada de um gene geralmente exógeno na bactéria e à sua integração no cromossoma da bactéria hospedeira. Todos os gonococos podem absorver, integrar e expressar o ADN de outros organismos, pelo que todos os gonococos são capazes de transformação. A capacidade de transformação é significativamente maior nos gonococos cabeludos do que nas variantes gonocócicas não cabeludas. A transformação pode ocorrer em qualquer altura durante o crescimento de um gonococo cabeludo. Os gonococos podem ser transformados por DNA plasmídeo e cromossómico;
(2) Encadernação.
A ligação é outra forma em que a informação genética gonocócica é trocada. O ADN é transferido e trocado quando os gonococos entram em contacto uns com os outros. O processo de ligação e troca de informação genética de pares é mediado por um plasmídeo muito grande de 24,5 megadalton. Este plasmídeo é capaz de transferir o seu plasmídeo de resistência entre diferentes estirpes gonocócicas. A transferência de plasmídeos resistentes pode ocorrer não só entre gonococos, mas também entre gonococos e outros tipos de bactérias, incluindo outras espécies de Neisseria, bem como Escherichia coli. Portanto, a ligação é importante para a propagação de plasmídeos resistentes aos antibióticos in vivo, e é de grande interesse estudar os mecanismos de troca de plasmídeos;
(3) Conjugação, translocação ou transposição.
A transdução refere-se à transferência de ADN da bactéria doadora para a bactéria receptora através de fago, que é depois incorporado no ADN da bactéria receptora por recombinação. A translocação ou transposição refere-se à troca de um segmento de sequência de ADN entre plasmídeos ou entre um plasmídeo e um cromossoma, resultando em resistência às drogas. No estudo de possíveis mecanismos de intercâmbio de material genético em gonococos, apenas duas modalidades, translocação e conjugação, foram identificadas até agora.
A resistência às drogas nos gonococos pode ser causada por cromossomas ou por plasmídeos resistentes às drogas. Com os desenvolvimentos em genética e biologia molecular, os mecanismos de resistência mediada por cromossomas em gonococos estão a tornar-se mais bem compreendidos. Acredita-se agora que existem dois tipos de resistência mediada por cromossomas: mutações de passo único nos genes de loci alvo de drogas, e mutações envolvendo vários genes de loci alvo de drogas, com a combinação de mutações em diferentes loci a determinar a extensão e o modo de resistência às drogas.
A investigação actual sobre resistência mediada por cromossomas tem-se centrado em mutações em múltiplos loci, incluindo os genes de proteína de ligação à penicilina (penA, penB), o gene de DNA helicase A (gyrA), o gene C-subunit da topoisomerase IV (parC), os genes de múltiplos sistemas de resistência transferíveis (MtrR, MtrC, MtrD, MtrE) e os genes de proteína do poro ( porin, pIA/pIB), etc. Os resultados destes estudos foram obtidos utilizando o “método de clonagem funcional” para clonar primeiro genes relacionados com sítios alvo de antibióticos ou resistência metabólica, tais como penA, penB, gyrA, parC, Mtr (MtrR, MtrC, MtrD, MtrE) e porino ( pIA/pIB), e em seguida analisados para alterações nas sequências genéticas correspondentes das estirpes que mostram fenótipos resistentes.
Muitos estudos têm demonstrado a existência de múltiplos mecanismos de resistência em estirpes gonocócicas resistentes à fluoroquinolona. Assim, a resistência gonocócica pode ser uma característica controlada multigene. No entanto, o número de genes que desempenham um papel na resistência gonocócica e a existência de genes associados à resistência mais importantes é um tópico que merece mais investigação.
Os gonococos têm diferentes taxas de resistência e mecanismos de resistência aos antibióticos habitualmente utilizados: o principal mecanismo de resistência à penicilina é a produção de β-lactamases; o principal mecanismo de resistência às tetraciclinas é a redução da permeabilidade das membranas celulares à droga; o principal mecanismo de resistência aos macrolídeos e macrólidos é a alteração dos sítios alvo de acção; o principal mecanismo de resistência às fluoroquinolonas são as mutações nos genes gyrA e parC; e a resistência à terceira geração Os mecanismos de reduzida susceptibilidade ou resistência às cefalosporinas de terceira geração ainda não são claros, mas estão intimamente relacionados com genes como o penB e o penA.
3. mecanismos de resistência aos medicamentos gonocócicos
1. plasmídeos resistentes a drogas
A resistência específica aos medicamentos dos gonococos pode ser causada por alterações genéticas nos cromossomas e plasmídeos, e os gonococos são geralmente classificados nos seguintes tipos de acordo com a sua resistência aos medicamentos: gonococos PPNG mediados por plasmídeos de penicilina; gonococos TRNG mediados por plasmídeos de tetraciclina resistentes aos gonococos; gonococos PPNG mediados por plasmídeos de tetraciclina resistentes à penicilina e à tetraciclina; gonococos CMRNG mediados por cromossomas resistentes à penicilina e à tetraciclina; e gonococos CMRNG mediados por cromossomas resistentes à penicilina e à tetraciclina. CMRNG gonococos cromossómicos resistentes tanto à penicilina como à tetraciclina; QRNG gonococos cromossómicos resistentes às quinolonas.
Os gonococos resistentes à penicilina com β-lactamases foram isolados pela primeira vez em 1976 e estudos demonstraram que esta resistência é mediada por plasmídeos e é resistente à penicilina e à ampicilina. A PPNG está actualmente disseminada em todo o mundo, com 50% ou mais de PPNG em muitas partes de África e da Ásia, o que coloca consideráveis dificuldades no tratamento da gonorreia; β – estirpes de Neisseria gonorrheae (CMRNG), mediadas por cromossomas, resistentes à neisséria, foram isoladas nos EUA em 1983; os plasmídeos foram identificados pela primeira vez em 1985 TRNG é resistente à tetraciclina, à dimetilaminotetraciclina e à doxiciclina. Os surtos locais de PPNG, CMRNG e TRNG foram confirmados como sendo um serotipo nutricional e o controlo deve concentrar-se no controlo de estirpes resistentes.
A investigação humana sobre plasmídeos gonocócicos começou nos anos 70. 2.6 MD de plasmídeos crípticos foram detectados pela primeira vez num caso de gonorreia em 1973 por Englkirk nos EUA, seguido de plasmídeos resistentes à penicilina (3.2-3.4 MD para o tipo africano, 4.4-4.7 MD para o tipo asiático e 3.05 MD para o tipo Toronto), plasmídeos altamente resistentes à tetraciclina (25.2 MD ) e o plasmídeo do tipo emenda (24,5 MD). Foi demonstrado que os plasmídeos de emenda estavam estreitamente relacionados com a disseminação de plasmídeos resistentes a drogas entre estirpes, e eram capazes de transferir os seus plasmídeos resistentes entre diferentes gonococos e mesmo entre gonococos e outras bactérias.
O plasmídeo 25.2MD carrega o gene TetM, que medeia altos níveis de resistência à tetraciclina. Pensava-se que este plasmídeo era formado pela aquisição do gene TetM do plasmídeo 24.5MD, mas Gascoyne et al. relataram que os perfis enzimáticos de restrição dos dois plasmídeos eram nitidamente diferentes, e pensa-se agora que o plasmídeo 24.5MD e o plasmídeo 25.2MD não são homólogos.
O plasmídeo 24.5MD está estreitamente relacionado com o plasmídeo 4. 4MD resistente à penicilina, e Lind et al. relataram que 81% do PPNG com o plasmídeo 4. 4MD também tinha o plasmídeo 24.5MD, sugerindo que o plasmídeo 24.5MD pode estar relacionado com a entrega do plasmídeo 4. 4MD. Os plasmídeos resistentes a drogas podem ser transferidos entre estirpes tanto por transformação como por emenda. Em experiências de transformação, Graves descobriu que apenas fragmentos homólogos podiam ser captados, pelo que a transformação plasmídica exigia a identificação de sequências específicas de ADN. Podem estar presentes receptores específicos na superfície dos gonococos. Estudos adicionais sobre a transformação de plasmídeos ajudarão a proporcionar uma compreensão mais clara dos mecanismos subjacentes à disseminação generalizada de plasmídeos resistentes a drogas.
Os plasmídeos crípticos 2.6MD podem ser detectados na maioria das estirpes e o seu significado não é claro.
Há uma variação regional significativa no transporte de plasmídeos em gonococos. Para além das diferenças regionais no transporte de plasmídeos gonocócicos, existe uma grande diversidade de plasmídeos resistentes à penicilina. A relação entre estes plasmídeos e a resistência gonocócica aos fármacos não é clara.
2. investigação sobre a tipagem serológica de gonococos
Foram utilizadas diferentes abordagens para compreender activamente a distribuição, frequência, origem e características epidemiológicas das estirpes resistentes aos medicamentos.
As características fenotípicas dos gonococos susceptíveis à fluoroquinolona (76 estirpes) e resistentes às drogas (21 estirpes) isolados de 97 pacientes com gonorreia em Sydney de 1991 a 1995 foram estudadas por tapsall et al. Os resultados da tipagem trófica/serotípica (A/S) mostraram que 97 estirpes gonocócicas pertenciam a 27 tipos A/S, das quais 10 estirpes (10%) eram do serotipo IA e pertenciam a 5 tipos A/S diferentes. 87 estirpes eram do serotipo IB e pertenciam a 22 tipos A/S diferentes. Todas as estirpes resistentes pertencem a serotipos IB, com 14 ciprofloxacina MIC 8 μg-16 μg/ml gonococci de 6 tipos diferentes de IBA/S. A diversidade dos fenótipos sugere que diferentes subtipos de gonococos são capazes de desenvolver resistência à fluoroquinolona.
Kam et al. estudaram os serótipos e perfis de susceptibilidade aos antibióticos de 69 estirpes resistentes isoladas de doentes que não conseguiram tratamento com ofloxacina em Hong Kong de Janeiro de 1991 a Janeiro de 1995, em comparação com outras 143 estirpes sensíveis. 69 estirpes resistentes pertenciam a 21 serótipos, a maioria (67/69) eram serótipos IB, com predominância da BoP e Bpy a 92,7%. A maioria dos serótipos IA e outros IB diminuiu durante a selecção da resistência às quinolonas.
Os 31 gonococos resistentes à fluoroquinolona isolados no Japão pertenciam a 11 serótipos, todos eles do grupo serogrupo WII/WIII (ou seja, o serotipo IB). Vários subtipos de gonococos mostraram alterações em gyrA e parC associadas à resistência às quinolonas. Estes estudos sugerem que o aparecimento de gonococos resistentes à fluoroquinolona na Austrália, Hong Kong e Japão é devido à selecção policlonal de estirpes com genes gyrA e parC alterados in vivo, e que certas estirpes do serotipo IB parecem ser mais susceptíveis à selecção.
Foi aplicado um teste de aglutinação sinérgica para estudar as alterações na tipagem serológica dos gonococos na região de Heidelberg, na Alemanha, entre 1985 e 1990. A tipagem serológica de 649 exemplares gonocócicos mostrou que 8 e 26 serótipos foram detectados entre os 24 conhecidos da proteína específica A (PIA) e 31 da proteína específica B (PIB), respectivamente, sendo os seis serótipos mais comuns IB-3 (19,0%), IB-4 (16,0%), IB-2 (15,7%), IB-1 (13,1%) IA-1/2 (11,7 %) e IA-6 (3,2 %). Além disso, encontrámos um PIB desconhecido com padrões serológicos de 3C8, 1F5, 2D4. Concluiu-se que o serótipo dos gonococos na região é ainda predominantemente IB.
3. enzimas inactivadoras para a produção de antibióticos
Alguns antibióticos clinicamente utilizados β-lactam como a penicilina (PC) e a cefalosporina (CS) contêm β-lactams. Os antibióticos β-lactam actuam selectivamente na parede celular bacteriana, e o anel β-lactam pode ligar-se à enzima transpeptidase que sintetiza os mucopeptídeos, tornando a enzima transpeptidase inactiva e inibindo assim a síntese da parede celular. Estes fármacos são menos tóxicos para as células animais não-celulares muradas e são, portanto, comummente utilizados na gestão clínica da gonorreia.
Alguns gonococos podem desenvolver resistência aos antibióticos β-lactamais através da produção de β-lactamases, que são diferentes tipos de enzimas que utilizam o anel β-lactam como substrato de degradação, o que pode reduzir ou eliminar o efeito antibacteriano dos antibióticos.
O mecanismo de acção: o centro activo da penicilinase ou cefalosporinase é a serina na cadeia de polipéptidos proteicos, que actua como nucleófilo e se combina com o grupo carboxil do anel de β-lactam para formar um intermediário acylase, o que leva à inactivação do anel de β-lactam sob a acção da molécula H2O, que é uma razão importante para a resistência dos gonococos aos antibióticos β-lactam.
4. alterar o local alvo da acção existente
Este mecanismo inclui as proteínas de penicilinaPBPs, a subunidade A de DNA helicase (gyrA) e a subunidade C de topoisomerase (parC).
4.1 Penicilinas-PBPBPs
A resistência causada pelos PBPs é mediada por plasmídeos e o plasmídeo resistente é capaz de codificar uma lactamase sintética β que perturba a estrutura da penicilina.
Os PBPs são enzimas localizadas na membrana celular, incluindo: transpeptidase peptidoglicano, transpeptidase glicose, carboxipeptidase, que desempenham um papel importante na manutenção da estabilidade da parede celular bacteriana, e são também os principais alvos dos antibióticos de β-lactam. PBP1, PBP2 (59000KD) e PBP3 (44000KD) são importantes sítios alvo de antibióticos. β-lactam antibióticos matam gonococos ligando-se especificamente aos PBPs na membrana celular gonocócica, interferindo com a síntese de peptidoglicanos da parede celular e afectando a síntese da parede celular. Em estirpes gonocócicas sensíveis, PBP2 liga-se 100% à penicilina; em estirpes gonocócicas resistentes, PBP2 liga-se apenas 25% à penicilina. Contudo, a mudança na afinidade PBP2 foi o resultado de uma mutação no locus Pen A no cromossoma
As mutações nos genes ponA e PenA, que são conhecidos por codificar PBPs, podem alterar a sequência de aminoácidos da mutação PBP1 correspondente (Leu-421 → Pro) e a mutação PBP2 (inserção de Asp-345a), afectando assim a ligação de gonococos a antibióticos de β-lactam, A taxa de acitilação da parede celular por antibióticos de β-lactam foi reduzida em 3-4 vezes, tendo assim o efeito de aumentar a resistência bacteriana.
4.2 Alteração de DNA helicase (gyrA) e topoisomerase (parC)
Alguns antibióticos de fluoroquinolona visam a helicase de DNA bacteriana, uma topoisomerase de DNA tipo II que desempenha um papel importante na replicação, recombinação e transcrição do DNA. Os gonococos exibem tolerância a estas drogas.
Yoshda et al. introduziram plasmídeos com o gene gyrA de estirpes resistentes a drogas em estirpes gonocócicas normais e mostraram que as estirpes sensíveis também eram resistentes à droga, enquanto outros descobriram que as mutações no gene gyrA podiam aumentar significativamente a resistência dos gonococos através do rastreio de placas gradientes de drogas.
Num outro estudo de Deguchi, foram encontradas mutações nos códões 91 e 95 no gene gyrA de estirpes resistentes a drogas, resultando na conversão de TCG (serina) em TTC (fenilalanina) na posição 91 e GAC (aspartato) em AAC (asparagina) na posição 95, bem como mutações nas posições 86, 87, 88 e 91 em parC, mas não em estirpes sensíveis a drogas. Este estudo sugere que os gyrA e parC loci são mecanismos de resistência importantes para os gonococos.
Belland et al. também investigaram a relação entre gyrA e parC em estirpes resistentes a drogas e descobriram que as mutações no locus gyrA eram o mecanismo de resistência mais importante nos gonococos, com mutações neste locus causando níveis baixos e moderados de resistência, enquanto as mutações no parC desempenharam um papel secundário na resistência gonocócica. A combinação da mutação gyrA e da mutação parC causou um alto nível de resistência às drogas.
4.3 Sinergia entre alterações de DNA helicase e redução da acumulação intracelular de drogas
A redução da acumulação de drogas intracelulares também está envolvida no desenvolvimento da resistência às drogas, mas o seu efeito é relativamente pequeno. A redução da acumulação de drogas intracelulares pode estar relacionada com o sistema de efluxo activo da membrana intracelular. Por exemplo, foi observada uma diminuição na absorção e acumulação de fluoroquinolona em isolados clínicos com susceptibilidade reduzida à fluoroquinolona. Num estudo de laboratório de estirpes mutantes selectivas, verificou-se que na ausência de mutações gyrA e parC, a estirpe mutante com acumulação reduzida de oxfloxacina intracelular tinha uma MIC de oxfloxacina 16 vezes mais elevada do que a estirpe parental; a estirpe mutante com uma mutação de gyrA num único local com acumulação reduzida de fármacos intracelulares tinha uma MIC 128 vezes mais elevada; a estirpe mutante com mutações tanto em gyrA como em parC com acumulação reduzida de fármacos intracelulares tinha uma MIC 256 vezes mais elevada. Os valores MIC das estirpes mutantes com mutações tanto em gyrA como em parC foram aumentados 256 vezes. Não houve diferenças significativas nas características das proteínas da membrana externa entre os mutantes resistentes aos medicamentos, com e sem redução da acumulação de medicamentos.
5. mecanismo do efluxo às drogas
O sistema Mtrefflux desempenha um papel importante no mecanismo de resistência às drogas dos gonococos. Este sistema determina a susceptibilidade dos gonococos a factores lipossolúveis (HAs), incluindo ácidos gordos, sais biliares, e antibióticos lipossolúveis.
Doughterty descobriu em 1986 que, além da resistência PPNG mediada pelo plasmídeo prc, existe outro grupo de gonococos resistentes que não produzem β-lactamases, mas todas estas estirpes têm variantes do sistema genético Mtr.
O sistema Mtr (mutipletransferableresistance) é um manipulador de resistência múltipla transferível (MTR) que consiste num gene repressor MtrR e três genes estruturais, MtrC, MtrD e MtrE, que podem codificar as proteínas correspondentes (MtrR, MtrC, MtrD e MtrE). -MtrC é uma proteína de fusão da membrana; MtrD é uma proteína de exocitose, localizada na membrana celular; MtrE é uma proteína do canal externo da membrana, localizada fora da membrana celular; MtrR é uma proteína reguladora, que inibe a transcrição de MtrCDE.
Este sistema é muito semelhante às bombas proteicas AcrAE e EnvCD na membrana celular E. coli e à bomba proteica MexABOprK na membrana celular Pseudomonas aeruginosa. O complexo genético Mtr de P. gonorrhoeae é uma bomba de proteína efluxante activa constituída por proteínas da membrana celular MtrC-MtrD-MtrE. O complexo MtrC-MtrD-MtrE transporta eficazmente vários antibióticos estruturalmente distintos e factores lipossolúveis (HAs) para fora da célula activamente, um processo catalisado pela ATPase a partir de lipoproteínas da membrana celular. Este sistema dependente de energia bombeia activamente as moléculas antibióticas para fora do gonococo para evitar a acumulação de medicamentos na célula, impedindo assim que os antibióticos atinjam as concentrações necessárias para os seus efeitos citotóxicos selectivos, pelo que este grupo de gonococos pode exibir uma resistência múltipla aos antibióticos.
A regulação da resistência às drogas múltiplas em gonococos pelo sistema Mtr efflux pode ser dividida em dois mecanismos:
1. mecanismo de regulação dependente de MtrR
No mecanismo regulador dependente de MtrR, o gene MtrR é conhecido por ser 630 bp, localizado 250 bp a montante do gene MtrCDE, que codifica uma proteína de 210 aminoácidos. As mutações nas bases do gene MtrR resultam numa síntese reduzida da proteína repressora MtrR e numa transcrição melhorada do gene MtrCDE a jusante do gene MtrR, resultando num aumento da proteína MtrCDE na membrana celular, o que por sua vez resulta no efluxo activo de antibióticos do sistema gonocócico Mtr efflux. A função activa do efluxo gonocócico do sistema Mtr efflux em resposta aos antibióticos.
2. mecanismos reguladores não dependentes de TRR
Além disso, existe um palíndromo de 13bp (5′-AAAAA-GACTTTTT-3′) na região promotora entre os genes MtrR e MtrC, e quando falta a última base T/A no final deste palíndromo de 3′, esta afecta a expressão de MtrR e A eliminação da última base T/A no final do 3′ deste palíndromo afecta a expressão dos genes MtrR e MtrC, aumentando assim a resistência dos gonococos aos antibióticos, numa regulação não dependente de MtrR. Foi demonstrado que este mecanismo de resistência gonocócica aos medicamentos é significativamente mais forte do que o da regulação dependente de MtrR.
Recentemente, descobriu-se que existe outro sistema na membrana celular gonocócica, nomeadamente o sistema Far, que é resistente aos ácidos gordos de cadeia longa e a alguns factores lipossolúveis, mas alguns estudiosos descobriram que embora o sistema Far e o sistema Mtr actuem independentemente sobre vários factores lipossolúveis e antibióticos, o sistema Far ainda precisa de contar com a proteína MtrE do canal externo da membrana, que também é regulada pela proteína MtrR.
6.Alteration da permeabilidade da membrana celular
Os antibióticos, tal como outras moléculas complexas, devem entrar na célula através de um canal externo de membrana lipopolissacarídeo, que é fornecido pela proteína do poro. A capacidade do antibiótico de passar através deste canal é afectada pela sua forma, tamanho e carga, e uma vez que a proteína do poro é mutada, as bactérias são susceptíveis à resistência aos medicamentos.
Existem pelo menos três proteínas da membrana externa nos gonococos, das quais a proteína I é a proteína principal, representando 60% das proteínas da membrana externa, e a antigenicidade da proteína I varia entre os gonococos. Este antigénio é estável e pode portanto ser utilizado para fazer anticorpos monoclonais para tipagem serológica de gonococos. Exprime-se em duas formas, PIA e PIB, e forma poros na membrana da célula. Permite que substâncias solúveis em água, outras substâncias importantes para o metabolismo bacteriano e certos antibióticos passem através da membrana celular e entrem na célula. A proteína II está associada à adesão de gonococos a células epiteliais humanas, leucócitos e adesão intercelular e é modificada termicamente. A proteína III é modificada de forma redutora, também conhecida como Rmp, e é fortemente imunogénica, reage cruzadamente com outras espécies de Neisseria e bloqueia o efeito bactericida de outros anticorpos.
Quando a expressão das proteínas da membrana externa PIA e PIB dos gonococos é reduzida ou não é de todo expressa, a quantidade de antibióticos que entram no citoplasma bacteriano é reduzida e os gonococos mostram resistência aos antibióticos.
7) Adaptação e outros mecanismos de evasão imunológica em gonococos
A variação dos componentes de superfície inclui variação bacteriófaga, variação da proteína Opa, variação LPS; utilização de componentes hospedeiros, tais como gonococos precisam de iões de ferro para o crescimento, expressão de receptores que reconhecem a transferrina e a lactoferrina, utilização de ferro do corpo. Alguns estudos demonstraram que o sistema de aquisição de ferro das bactérias é também o factor de virulência básico. Existem também mecanismos de evasão imunológica, tais como a sobrevivência intra-bacteriana e a resistência ao soro.