http://blog.sina.com.cn/bb13 Estudo sobre a melhoria da atividade da enzima do acrossoma do esperma humano pela Decocção de Qiang Jing Bin Bin1 Wang Jie1 Wang Quan Sheng1 Li Guofeng2 (1. Departamento de Ginecologia, O Primeiro Hospital Afiliado da Faculdade de Medicina Tradicional Chinesa de Guangxi, Nanning 530023 Bin Bin, Departamento de Ginecologia, O Primeiro Hospital Afiliado da Faculdade de Medicina Tradicional Chinesa de Guangxi, Nanning 2. Departamento de Ginecologia, Hospital de Medicina Tradicional Chinesa de Yangjiang, Yangjiang 529500, Província de Guangdong, China) Resumo OBJECTIVO: Observar o efeito da Decocção Qiang Jing da medicina herbal chinesa na atividade da enzima acrossoma do esperma humano. Métodos: Sessenta pacientes diagnosticados com baixa atividade da enzima do acrossoma e oligospermia foram divididos em dois grupos de 30 casos cada, utilizando o método da tabela de números aleatórios. No grupo de tratamento, foi administrada uma dose diária de decocção Qiang Jing por via oral, dividida em doses matinais e vespertinas; no grupo de controlo, foram administradas quatro cápsulas por via oral, três vezes por dia. O ciclo de tratamento foi de três meses em ambos os grupos. Em ambos os grupos, a atividade da enzima acrossomal foi medida pelo método Kennedy modificado antes e após o tratamento, e a qualidade dinâmica do esperma foi medida pelo Weili Colour Sperm Quality Test System antes, ao fim de 4 semanas, ao fim de 8 semanas e após o tratamento. Os dados obtidos foram processados pelo pacote estatístico SPSS 11.5. Resultados: 1. tanto a Decocção Qiang Jing como as Cápsulas Sheng Jing melhoraram a atividade da enzima acrossoma e a densidade e vitalidade do sémen dos pacientes, e a diferença entre o antes e o depois foi significativa; 2. o efeito da Decocção Qiang Jing no aumento da vitalidade do esperma foi semelhante ao das Cápsulas Sheng Jing, e a diferença entre os dois grupos não foi significativa; 3. o efeito da Decocção Qiang Jing na melhoria da atividade da enzima acrossoma do esperma foi melhor do que o das Cápsulas Sheng Jing, e a diferença entre os dois grupos foi significativa. Conclusão: A fórmula herbal chinesa Qiang Jing Decoction, que tonifica principalmente o rim e fortalece o baço, e também limpa o calor, alivia a humidade e ativa a circulação sanguínea para remover a estagnação do sangue, tem efeitos terapêuticos na infertilidade masculina causada pela diminuição da atividade da enzima acrossoma do esperma em seres humanos. Palavras-chave: Decocção de sémen forte; infertilidade masculina; atividade da enzima acrossoma; terapia da medicina chinesa A enzima acrossoma do esperma actua como agente de lise da zona pelúcida do oócito quando o espermatozoide penetra na zona pelúcida, pelo que o seu nível de atividade pode afetar diretamente a conceção [1-3]. O teste da atividade enzimática do acrossoma é um indicador importante da qualidade dos espermatozóides vivos [4~5]. Com base na nossa experiência clínica de longo prazo, concluímos que “a deficiência do baço e do rim, combinada com humidade, calor, estase e toxicidade” [?] [?] A fórmula experimental Qiang Jing Decoction [6], que é guiada por esta teoria, é eficaz na tonificação dos rins e no fortalecimento do baço, bem como no revigoramento do sangue, na eliminação do calor e no alívio da humidade, etc. Estudos demonstraram que esta fórmula tem o efeito de melhorar a qualidade do esperma, reparar os danos patológicos testiculares em ratos modelo [7] e reduzir a taxa de apoptose das células espermatogénicas [8]. Neste estudo, o efeito da Decocção Qiang Jing na atividade da enzima acrossoma do esperma humano foi observado de forma controlada para fornecer uma base para experiências humanas sobre este tipo de fórmula no tratamento da infertilidade masculina. 1 Materiais e métodos 1.1 Materiais 1.1.1 Fontes de registos médicos e critérios de diagnóstico e exclusão 1.1.1.1 Fontes de registos médicos Todos os 60 casos foram obtidos de pacientes que frequentaram a clínica ambulatória masculina do Primeiro Hospital Afiliado da Faculdade de Medicina Tradicional Chinesa de Guangxi de fevereiro de 2009 a dezembro de 2009. 1.1.1.2 Critérios diagnósticos: ① Oligozoospermia: consultar os critérios diagnósticos recomendados no Manual de Testes Laboratoriais da OMS de 2001 para a Interação Sémen Humano e Esperma-Muco Cervical [9]. Ou seja: densidade espermática <20 × 106 / ml, ou contagem total de espermatozóides <40 × 106 como oligospermia; espermatozóides de movimento rápido para a frente (classe a) + contagem de espermatozóides de movimento lento ou lento para a frente (classe b) <50%, ou classe a <25%, ou classe a + classe b + espermatozóides de movimento não avançado (classe c) <60% dentro de 60 min após a ejaculação como espermatozóides fracos; ② Hipofunção do acrossoma: acrossoma do esperma (3) Homens casados com idade entre 22-45 anos com duração da infertilidade de 1-10 anos. 1.1.1.3 Critérios de inclusão: Três que preencham os critérios de diagnóstico. 1.1.1.4 Critérios de exclusão: Pacientes com anomalias cromossómicas que causam infertilidade; pacientes com infecções graves do trato reprodutor; pacientes com função hepática e renal e anomalias cardiovasculares que requerem medicação a longo prazo; pacientes com neurose e perturbações psiquiátricas; pacientes com varicocele II ou superior; pacientes com densidade espermática <5×106/ml. 1.1.1.5 Critérios de retirada: A segurança e a conformidade do medicamento devem ser registadas em visitas de acompanhamento quinzenais. As retiradas serão registadas nos seus registos médicos e o último resultado do teste será considerado final. 1.1.2 Medicamentos Decocção de Qiang Jing: utilizando grânulos de fórmula herbácea única, produzidos pela Jiangyin Tianjiang Pharmaceutical Co., Ltd. da província de Jiangsu. A sua principal composição e dosagem do medicamento (equivalente à quantidade de comprimidos para beber): Cuscuta sinensis 20g, Fructus Lycii 20g, Yimu Cao 30g, Creme de chifre de veado 10g, Astragalus membranaceus 30g, Radix Angelicae Sinensis 10g, Radix et Rhizoma Sequoiae 10g, Oyster 30g, Shen Qu 10g, etc. Cápsula de essência bruta: produzida por Zunyi Liao Yuanhe Tang Pharmaceutical Co., Ltd, lote n.º: 20080701. Especificação: 24 cápsulas/caixa, 0,4g/cápsula. 1.2 Método experimental 1.2.1 Agrupamento de doentes Os doentes foram divididos no grupo de controlo que tomava cápsulas de Shengjing e no grupo de tratamento que tomava decocção de Qiangjing pelo método de tabela de números aleatórios, 30 casos em cada grupo. 1.2.2 Método de administração e coleta de amostras ① Método de administração: O grupo de controle recebeu cápsula de esperma por via oral, 4 cápsulas / hora, 3 vezes / dia; o grupo de tratamento recebeu Decocção de Essência Forte, 1 dose / dia, o medicamento foi derramado em um copo, adicionado cerca de 200ml de água fervida quente, mexido para derreter, se houvesse algum coágulo, poderia ser deixado de molho por cerca de 10 minutos e depois continuar a mexer. Ambos os grupos foram tratados continuamente durante 12 semanas. Outros medicamentos utilizados para tratar a doença foram interrompidos 2 semanas antes e durante o período de tratamento, e foram suspensos durante o período de frio e febre; se outras doenças precisavam ser tratadas, foram utilizados medicamentos que não afetavam a doença. ②Coleta de amostras: Colete esperma por masturbação antes do início do tratamento e dentro de 3 dias no final da 4ª, 8ª e 12ª semana de tratamento, respetivamente. 1.2.3 Teste das amostras ①Dinâmica do esperma: o teste foi realizado com o Sistema de Teste de Qualidade de Esperma de Cor Weili (WLJY-9000). ②Atividade da enzima do acrossoma espermático: testada pelo método Kennedy modificado. 1.2.4 Critérios para determinar a eficácia: Consulte o Manual de Exame e Diagnóstico Padrão da OMS para Casais Inférteis [10] e os critérios de eficácia relevantes nas Diretrizes do Ministério da Saúde para Pesquisa Clínica sobre Novos Medicamentos Chineses [11] combinados com a situação clínica real para revisão. Curado: conceção do cônjuge ou normalização das enzimas do acrossoma, densidade e motilidade dos espermatozóides; Eficaz: embora o teste de rotina dos espermatozóides não fosse normal, as enzimas do acrossoma dos espermatozóides, a motilidade e os espermatozóides móveis de grau a ou a+b melhoraram em ≥ 30%, e a densidade dos espermatozóides melhorou em ≥ 2×106/ml após o tratamento da oligospermia; Ineficaz: aqueles que não cumpriram os critérios acima após o tratamento. 1.2.6 Método de processamento estatístico Todos os dados experimentais foram processados usando o pacote estatístico SPSS11.5, com P <0,05 como diferença significativa e P <0,01 como diferença muito significativa. 2 Resultados experimentais 2.1 Sintomas, sinais e observações gerais Todos os doentes dos dois grupos desta experiência tomaram todos os medicamentos conforme necessário e não foram observadas reacções adversas significativas. 2.2 Resultados do teste do sémen Nos dados do teste dos dois grupos de doentes realizados antes do tratamento, os dados da atividade da enzima do acrossoma, volume do sémen, densidade do esperma, vitalidade do esperma, viabilidade do esperma, tempo de liquefação e valor do pH foram testados pelo teste t, P > 0,05, e a diferença não foi significativa. Após o tratamento, a atividade da enzima acrossoma, a densidade espermática, a motilidade e a viabilidade espermática dos pacientes em ambos os grupos foram comparadas com aquelas antes do tratamento no mesmo grupo, e a diferença foi significativa em P <0,05 pelo teste t. Houve uma diferença significativa no aumento da atividade da enzima acrossoma no grupo Qiang Jing Decoction em comparação com o grupo Sheng Sheng Capsule pelo teste t, P <0,05. A diferença no volume de sêmen, tempo de liquefação e pH entre os dois grupos antes e depois do tratamento não foi significativa pelo teste t, P> 0,05. A densidade do esperma, a vitalidade e a viabilidade do esperma foram comparadas entre os dois grupos antes e depois do tratamento, pelo teste t, P > 0,05, a diferença não foi significativa. Ver Tabela 1: Tabela 1 Comparação das amostras de sêmen testadas antes e após o tratamento (±s) Grupo Número de casos Atividade da enzima acrossoma (μIU/106 espermatozoides) Volume de sêmen (ml) Densidade espermática (×106/ml) Grupo de decocção de esperma forte Antes do tratamento Após o tratamento Antes do tratamento Após o tratamento 30 30 30 30 30 29,879±10,513△ 49,548±8,443*◆ 31,686±8,748 42.797±9.000* 3.54±0.81△ 3.61±0.62 3.68±0.77 3.57±0.51 18.31±7.34△ 28.15±6.25* 18.87±6.70 27.46±6.19* Grupo cápsula de espermatina Nota: △ P > 0.05 pelo teste t antes do tratamento comparado com o grupo cápsula de espermatina; * O mesmo grupo após o tratamento comparado com o grupo pré-tratamento. P < 0,05 pelo teste t após o tratamento em comparação com antes do tratamento; ◆P < 0,05 pelo teste t em comparação com o grupo da cápsula de produção de esperma após o tratamento. Tabela 1 (cont.) Comparação das amostras de sêmen testadas antes e após o tratamento (±s) Grupo Número de casos Grau de viabilidade espermática a (%) Grau de viabilidade espermática a+b (%) Grau de viabilidade espermática a+b+c (%) Grupo de decocção de esperma forte Grupo de cápsula de produção de esperma Antes do tratamento Após o tratamento Antes do tratamento Após o tratamento 30 30 30 30 30 8.16±4.57△ 23.53±5.72* 6.08±4.28 22.52±4.10* 15.90±6.11△ 47.63±10.36* 15.67±4.88 45.34±7.56* 30.29±8.00△ 64.04±12.40* 30.82±7.82 60.48± 6,81* Tabela 1 (continuação) Comparação das amostras de sémen testadas antes e depois do tratamento (±s) Grupo Número de casos Tempo de liquefação (min) Valor de pH Grupo decocção de sémen forte Grupo cápsula de sémen cru Antes do tratamento Depois do tratamento Antes do tratamento Depois do tratamento 30 30 30 30 30 22,0±5,54△ 21,57±3,91 22,0±5,42 22,57±5,96 7,48±0,28△ 7,48±0,23 0.23 7.45±0.34 7.38±0.34