A espironolactona tem uma estrutura semelhante à da aldosterona e é um inibidor competitivo da aldosterona, que actua nos túbulos distais e nos canais colectores do rim, bloqueando as trocas sódio-hidrogénio e sódio-potássio e, consequentemente, os efeitos de retenção de sódio e potássio da aldosterona. O efeito diurético é fraco, uma vez que apenas actua no túbulo distal e nos canais colectores do rim, não tendo qualquer efeito nos outros segmentos do túbulo. Além disso, a espironolactona tem um efeito benéfico noutros órgãos-alvo da aldosterona e pode ser utilizada no diagnóstico e tratamento do aldosteronismo primário. É também útil noutras doenças edematosas, na hipocaliémia e na hipertensão. No entanto, a espironolactona também tem efeitos secundários, como a ginecomastia, a impotência e as irregularidades menstruais nas mulheres.