O vírus da hepatite B é resistente ao mundo exterior e tolera o calor, a baixa temperatura, a secagem e a luz ultravioleta. Pode sobreviver durante 7 dias a 37°C, 6 horas a 56°C, 6 meses a 30-32°C no soro e 15 anos a -20°C. A ebulição durante 10 minutos, a 65°C durante 10 horas ou a autoclavagem podem inactivá-lo. O óxido de etileno, o glutaraldeído, o ácido peroxiacético e o iodofórmio têm todos um bom efeito inactivador do vírus da hepatite B. Na vida quotidiana, os artigos que podem ser fervidos em água podem ser inactivados fervendo-os durante 10 minutos; os artigos que não podem ser fervidos em água podem ser desinfectados limpando-os com ácido peroxiacético ou iodofórmio.