Os factores que afectam a reação enzimática incluem a concentração da enzima, a concentração do substrato da reação, a temperatura e o pH, o inibidor e o ativador.
1) Concentração de enzima: quando outros factores de influência são certos, quanto maior for a concentração de enzima, maior será a velocidade da reação enzimática, ou seja, a velocidade da reação é proporcional à concentração de enzima.
2) Concentração do substrato de reação: quando outros factores são certos, a velocidade de reação e a concentração de substrato numa hipérbole retangular, ou seja, quando a concentração de substrato é muito baixa, a velocidade de reação é proporcional à concentração de substrato, quando a concentração de substrato continua a aumentar, o aumento da velocidade de reação abranda gradualmente e atinge a velocidade máxima de reação, com o aumento da concentração de substrato, a velocidade de reação deixa de aumentar.
3) Temperatura e pH: As reacções enzimáticas têm uma temperatura e um pH óptimos. Na temperatura e no pH óptimos, a velocidade de reação é a mais rápida, se for demasiado alta ou demasiado baixa, a velocidade de reação diminui.
4) Inibidores e activadores: substâncias que inibem ou activam as reacções enzimáticas.