Primeiro obstáculo: o aparelho reprodutor feminino: os espermatozóides têm de passar pela vagina, pelo colo do útero e pela cavidade uterina antes de chegarem às trompas de Falópio, onde esperam que o óvulo os fecunde. Segundo obstáculo: o zigoto do óvulo feminino: o zigoto é uma camada de células da granulosa que se encontram imediatamente fora do óvulo e que estão dispersas num ácido hialurónico gelatinoso, um mucopolissacarídeo que pode ser degradado pela enzima hialuronidase, que está contida no acrossoma da cabeça do espermatozoide e que dissolve o zigoto, abrindo o segundo obstáculo. O terceiro obstáculo: a zona pelúcida do óvulo feminino: depois de o espermatozoide penetrar no ovócito e atingir a zona pelúcida, o acrossoma da cabeça do espermatozoide contém enzimas de diferentes composições, a mais importante das quais é a enzima acrossomal, com a libertação da enzima acrossomal do espermatozoide, a membrana acrossomal forma muitos orifícios e, ao mesmo tempo, os espermatozóides ligam-se à zona pelúcida. A reação acrossómica liberta uma grande quantidade de enzimas acrossómicas, que alteram a estrutura da membrana celular da placa equatorial da cabeça do espermatozoide, preparando a fusão das membranas do espermatozoide e do óvulo no futuro. Por conseguinte, a integridade e a morfologia normal do acrossoma na cabeça do espermatozoide são importantes para o contacto mútuo entre o espermatozoide e o óvulo. O quarto obstáculo: a membrana do óvulo feminino O acrossoma do espermatozoide dissolve a zona pelúcida e precisa de um último obstáculo – a membrana do óvulo. A combinação de espermatozoide e óvulo leva a uma série de alterações locais na membrana do óvulo, o que acaba por levar à ocorrência de resposta cortical e impede a ocorrência de fertilização polispermática e, ao mesmo tempo, o núcleo do espermatozoide e o núcleo dos óvulos se combinam para formar o procarião, que formará o sincício algumas horas depois. Ao mesmo tempo, o núcleo do espermatozoide combina-se com o núcleo do óvulo para formar um núcleo procariótico e, após algumas horas, forma-se um sincício e a fertilização é finalmente concluída. Assim, o pH da vagina, a natureza do muco cervical, a presença de anticorpos anti-espermatozóides e a integridade morfológica do acrossoma do espermatozoide são factores que podem afetar a fecundação.