A hepatite B pode ser detectada através de testes de sangue, mas é importante notar que o teste se refere a um teste de sangue para os cinco testes de hepatite B, também conhecido como teste de duas e meia hepatite B, em vez de testes de sangue de rotina ou bioquímica sanguínea. O primeiro par do teste refere-se ao antigénio de superfície e ao anticorpo de superfície, o segundo par é e antigénio e e anticorpo, e a metade refere-se ao anticorpo de núcleo. Este teste pode reflectir se o corpo está infectado com o vírus da hepatite B, mas para obter uma imagem completa da infecção, é normalmente combinado com a quantificação do HBV-DNA (também uma análise ao sangue), que pode reflectir melhor a forma como o vírus se está a replicar no corpo. Para a prova de dois pares da hepatite B, geralmente indicada como 1. HBsAg (antigénio de superfície da hepatite B), 2. HBsAb (anticorpo de superfície da hepatite B), 3. HBeAg (antigénio da hepatite B e), 4. Os itens positivos 1, 4 e 5 indicam que a pessoa está infectada com um trigémeo menor, o que geralmente indica que o vírus se está a replicar rapidamente e é relativamente menos infeccioso; 3. 5, 1, 3 positivos indicam que a infecção está em curso e deve ser tratada prontamente; 6, 2, 4, 5 positivos indicam recuperação da infecção aguda da hepatite B.