As enzimas acrossómicas encontram-se na membrana interna do acrossoma espermático e na parte equatorial da membrana, geralmente na forma inactiva, e são activadas como enzimas acrossómicas quando a cabeça do esperma entra na zona pelúcida do óvulo. Esta enzima é uma hidrolase proteica neutra que é essencial para a fertilização e actua de forma semelhante à tripsina. Hidrolisa a glicoproteína da zona pelúcida do óvulo, permitindo que o esperma atravesse o monte de óvulos e depois a zona pelúcida, permitindo que o esperma se funda com o óvulo; promove também a libertação de cininas no aparelho reprodutivo, aumentando assim a viabilidade do esperma e facilitando a motilidade do esperma. As enzimas acrossómicas são essenciais para a motilidade e fertilização dos espermatozóides, e uma actividade insuficiente das enzimas acrossómicas pode levar à infertilidade masculina. A actividade enzimática acrossómica do esperma pode assim ser utilizada como um indicador de referência para a fertilização do esperma e o diagnóstico da infertilidade masculina.