Métodos de detecção e significado clínico dos oito itens de infecção cirúrgica
Departamento de Doenças Infecciosas, Hospital Geral da Força Aérea (100036) Zhou Ping
Os oito testes de infecção cirúrgica são testes pré-operatórios obrigatórios em todos os hospitais. HCV), anticorpos para antigénios HIV (anti-HIV) e anticorpos específicos do soro para sífilis (anti-TP). O objectivo é prevenir, reduzir e evitar a infecção cruzada e a transmissão destes vírus no hospital durante a cirurgia e prevenir riscos médicos e disputas médicas. Este artigo descreve sucintamente os oito testes de infecção cirúrgica e o seu significado clínico no nosso hospital, como se segue. Zhou Ping, Departamento de Medicina de Infecções, Hospital Geral da Força Aérea
I. Métodos de ensaio.
Actualmente, existem três métodos imunológicos principais para testar os oito itens de infecção cirúrgica na maioria dos hospitais na China: dois imunoensaios enzimáticos (EIA e ELISA) e imunoensaios de micropartículas de quimioluminescência (abreviatura: quimioluminescência). As vantagens da primeira: alta especificidade e sensibilidade, menor custo; desvantagens: operação mais complexa e demorada, apenas detecção qualitativa; as vantagens da segunda: alta especificidade e sensibilidade, operação fácil, rápida, quantitativa (por exemplo: HbsAg e anti-HBs)/semi-análise quantitativa; desvantagens: maior custo de detecção.
II. significado clínico.
(i) Significado clínico dos cinco testes da hepatite B
Os cinco indicadores de HBsAg, anti-HBs, HBeAg, anti-HBe e anti-HBc são geralmente conhecidos como “Hepatite B Cinco” ou “Hepatite B Dois e Meio”. Como analisar correctamente o significado clínico destes indicadores é um problema que os clínicos frequentemente encontram e consideram complicado.
1. antigénio de superfície da hepatite B (HBsAg)
O HBsAg é um marcador da infecção pelo HBV e é o primeiro marcador do vírus a aparecer no soro do corpo. O HBsAg pode ser detectado 2 semanas após a transfusão de sangue HBsAg positivo, ou 6 dias após a vacinação se testado pelo método RIA; se a dose de infecção for baixa, pode demorar até 3-4 meses ou mesmo 6 meses para o HBsAg parecer positivo; geralmente, o HBsAg pode aparecer 4-6 semanas após a infecção com HBV. (em média cerca de 4 semanas) antes do aparecimento dos sintomas de hepatite e de funções hepáticas anormais. O período de incubação é de cerca de 2 meses para infecções transmitidas pelo sangue e cerca de 3 meses para infecções orais.
O curso da hepatite B aguda dura geralmente 1-3 meses, e 80% a 90% dos doentes são clinicamente curados [1]. A positividade do HBsAg no sangue dura geralmente 1-6 semanas, e até 20 semanas (14-148 dias) nos casos mais longos; desaparece 1-4 semanas após o início dos sintomas da hepatite ou após o pico das transaminases séricas Se o HBsAg positivo persistir por mais de 6 meses e não mudar para negativo, é chamado de positividade persistente ou estatuto de portador crónico; no caso da hepatite B aguda, a positividade persistente do HBsAg por mais de 6 meses é indicativa de crónica. A duração da positividade do HBsAg e a proporção de hepatite B crónica aguda estão relacionadas com a idade da pessoa infectada, e quanto mais jovem for a pessoa, maior é a probabilidade de formar uma infecção persistente ou de ter uma condição crónica [2]. Quanto mais nova for a idade, maior a probabilidade de desenvolver infecção persistente ou crónica da doença; 80% dos bebés infectados perinatalmente tornar-se-ão portadores de HBsAg; cerca de 30% dos infectados na primeira infância tornar-se-ão portadores persistentes de HBsAg, e a proporção de adultos normais infectados com HBsAg que desenvolvem infecção persistente pode ser inferior a 5%; cerca de 35%-50% dos portadores de HBsAg-positivos na população social em geral são infectados durante o período perinatal de mãe para filho [ 3]. Kaganov et al [2, 3] seguiram 129 crianças menores de 15 anos com verdadeira infecção aguda durante 2 a 24 meses, 115 foram curadas e a maioria produziu anti-HB, 14 (com menos de metade da idade) morreram de hepatite fulminante e não se observou qualquer cronicidade. Isto indica que a grande maioria dos casos de hepatite B aguda têm um bom prognóstico e não são crónicos. No entanto, a conversão do HBsAg é muito difícil em pessoas com infecção crónica pelo HBV, com uma taxa anual negativa de conversão do HBsAg de 0,8% em pessoas cronicamente infectadas com histologia hepática normal e de 0,5% naquelas com hepatite crónica confirmada histologicamente [4].
A positividade do HBsAg indica a presença de infecção pelo HBV, e o seu estado de infecção tem duas condições: (1) existe uma replicação viral completa e é infecciosa. Neste caso, outros indicadores de replicação viral também são positivos, tais como HBeAg, HBVDNA, HBVDNA-P e Pré-S1, S2, etc.; (2) não há replicação viral completa e não há infecciosidade; durante a integração do HBVDNA no genoma da célula hospedeira, os genes que expressam outras proteínas virais são perdidos, e apenas o HBsAg é expresso sem formação viral completa [2]. Clinicamente, a positividade do HBsAg pode ser observada nas fases latentes e agudas de pacientes com hepatite B aguda; hepatite B crónica, em portadores assintomáticos; no soro de alguns pacientes com cirrose e cancro do fígado e no plasma de hepatócitos infectados pelo HBV.
O HBsAg positivo indica geralmente a presença de infecção pelo HBV no organismo, mas um teste negativo não exclui completamente a infecção pelo HBV. As razões para isto são: (i) o HBsAg pode não ser detectado devido à presença de níveis muito baixos de HBV e HBsAg, o ensaio pode não ser suficientemente sensível, ou podem ocorrer falsos negativos devido a problemas com a qualidade e manipulação do reagente; (ii) a expressão e secreção do HBsAg pode ser prejudicada devido a mutações do gene S, e o HBsAg pode não ser detectado no soro ou pode ser raro apesar da presença de HBV no corpo [5,6]; (iii) o HBsAg expresso após mutações do gene S não pode ser detectado por alguns dos reagentes agora amplamente utilizados [6]. (3) O HBsAg expresso após a mutação do gene S não pode ser detectado por alguns reagentes que são agora amplamente utilizados [7,8]. Estes dois últimos, embora HBsAg negativo, são frequentemente acompanhados de positividade para outros marcadores de infecção pelo HBV, tais como HBeAg, anti-HBe e anti-HBc. Mesmo que verdadeiramente negativa, a infecção pelo HBV não pode ser completamente excluída, pois em 8% dos pacientes com hepatite B, o HBsAg tornou-se negativo antes do início dos sintomas; se o anti-HBs ou anti-HBe parecer positivo 2 a 9 meses após o início da doença, o diagnóstico de hepatite B aguda ainda pode ser feito [9]. Na hepatite B fulminante, muitas vezes os anti-HBs aparecem cedo e o HBsAg é negativo; a hepatite B aguda pode ocorrer após transfusão de HBsAg-negativo mas anti-HBc-positivo. A presença de HBVDNA no soro de certos pacientes com hepatite HBsAg-negativa e dadores de sangue pode ser ainda mais confirmada usando a PCR [10].
Ao analisar resultados positivos do HBsAg, vários pontos devem ser observados: 1) A gravidade da hepatite ou do estado da pessoa infectada não deve ser julgada pelo nível do título de HBsAg. O título do HBsAg no soro de pacientes infectados com HBV flutua frequentemente, e não há relação directa entre o título e a doença. Um aumento do título do HBsAg não indica que a doença é grave, nem uma diminuição do título indica que a doença está a melhorar. Algumas pessoas acreditam mesmo que o título de HBsAg e a doença estão inversamente relacionados. O HBsAg em si não contém ácido nucleico viral e não é infeccioso, mas os soros HBsAg-positivos, independentemente do título, podem conter doses infecciosas de partículas virais. Se o HBVDNA estiver integrado no ADN hepatócito hospedeiro e não houver partículas virais livres no soro, então o sangue HBsAg-positivo não é infeccioso. ④ Os títulos HBsAg não devem ser utilizados como indicador para avaliar ou julgar a eficácia do tratamento clínico com um determinado medicamento. Como mencionado anteriormente, o HBsAg não reflecte a gravidade da doença nem contém o componente ácido nucleico do vírus, e ele próprio flutua frequentemente, pelo que não existe base científica para utilizar a subida ou descida do título do HBsAg para indicar a eficácia de um determinado medicamento [11].
2. anticorpo de superfície para hepatite B (anti-HBs)
Anti-HBs é um anticorpo neutralizante que proporciona imunidade protectora contra o HBV, neutralizando a infecção pelo HBV e protegendo a reinfecção. A maioria dos pacientes com infecção auto-limitada pelo HBV desenvolve anti-HB durante a fase de recuperação da infecção aguda. 80% dos pacientes desenvolvem anti-HB dentro de algumas semanas a alguns meses após o desaparecimento do HBsAg e a resolução dos sintomas clínicos. o aparecimento precoce e o título de anti-HBs estão associados a infecções repetidas. A taxa de positividade dos anti-HBs é mais alta no período de recuperação da hepatite B aguda e baixa em todos os outros tipos de hepatite B. Em geral, os soros positivos anti-HBs são negativos para HBsAg/anti-HBs-IgM e normais para ALT.
A positividade do anti-HBs pode ser observada em: (1) recuperação da hepatite B; (2) pacientes com infecção anterior pelo HBV; (3) após vacinação contra a hepatite B; (4) alguma hepatite B fulminante; pacientes em recuperação da infecção natural têm duplo soro positivo anti-HBs e anti-HBc, devido à longa duração da persistência do anti-HBc (>8-10 anos) e curta duração da persistência do anti-HBs (6 meses ～The a positividade de um único anti-HB é rara (excepto no caso da vacinação contra a hepatite B) devido à longa duração do anti-HBc (>8-10 anos) e à curta duração do anti-HBs (6 meses-3 anos).
Clinicamente, é por vezes possível encontrar tanto HBsAg como anti-HBs positivos, um padrão relatado no estrangeiro com uma incidência global de 32% em todos os tipos de hepatite e 5,75% na China. Observa-se nas seguintes situações: (1) fase de equilíbrio dinâmico do antigénio e anticorpo; (2) anti-HBs falsos positivos; (3) infecção dupla com diferentes subtipos do HBsAg ou reinfecção com HBV homozigoto; (4) função imunitária anormal do organismo, após mutação do gene viral S, que obviamente altera a estrutura antigénica do HBsAg, tornando-o incapaz de reagir com os anti-HBs da estirpe selvagem de uma forma neutralizante, resultando em Os anti-HBs da estirpe viral e o HBsAg da estirpe mutante persistem simultaneamente no mesmo corpo [12] incapaz de processar HBsAg; (5) reinfecção com HBV-2 nas pessoas anteriormente infectadas com HBV-1 ou vacinadas contra a hepatite B [2].
O efeito protector dos anti-HBs no organismo tem sido objecto de desacordo nos últimos anos, e alguns descobriram que a infecção acidental com HBV no pessoal médico anti-HBs-positivo pode levar à hepatite B aguda. Na China, Luo Resist Xian et al [13] aplicaram a técnica PCR para detectar 9 casos de pacientes anti-HBs positivos e 4 casos de HBVDNA positivo. O efeito protector dos anti-HBs sobre o organismo pode estar relacionado com diferentes subtipos de infecção pelo HBV. Os anti-HBs do mesmo subtipo são apenas protectores contra o mesmo subtipo de infecção pelo HBV, enquanto que não são protectores ou não são muito protectores contra diferentes subtipos de infecção pelo HBV. Pode também estar relacionado com o facto de a concentração efectiva de anti-HBs no sangue ser demasiado baixa.
3. Hepatite B e antigénio (HBeAg)
O HBeAg é um componente solúvel do antigénio do núcleo da hepatite B, frequentemente presente juntamente com o soro HBVDNA, DNA-P e partículas de Dano, e é um marcador da replicação do HBV e da infecciosidade. O HBeAg aparece geralmente 1 semana após o HBsAg e desaparece 2 semanas antes do HBsAg; se o HBeAg permanecer positivo durante mais de 10 semanas, a doença pode tornar-se crónica. A positividade do HBeAg no soro só é observada em: hepatite aguda com HBsAg positivo, hepatite crónica, portadores assintomáticos de HBsAg e alguns pacientes com cirrose e cancro do fígado. Nas infecções crónicas, a taxa de positividade do HBeAg diminui com a idade; a taxa anual negativa natural de HBeAg em pacientes com hepatite B crónica é de 25,6%. As transportadoras assintomáticas são 9,3% [14].
Em termos gerais, a positividade do HBsAg só é vista em soros HBsAg positivos. Clinicamente, a negatividade do HBsAg e a positividade do HBeAg podem por vezes ser vistas pelas seguintes razões: (1) o método de detecção do HBsAg não é suficientemente sensível; (2) interferência do factor reumatóide no soro, resultando em falsa positividade. (3) O HBsAg não é detectado porque o HBsAg existe na forma de complexos imunitários com anti-HBs. (4) Após o desaparecimento do HBsAg e o aparecimento do anti-HBs, o HBV permanece no soro, e o HBsAg na superfície das suas partículas dinamarquesas é envolto por anti-HBs, de modo que não é detectado. ⑤ A qualidade e manipulação do reagente também pode levar a falsos positivos para HBeAg [1].
4. anticorpo Hepatite B e (anti-HBe)
A presença de anti-HBe aparece após um teste HBeAg negativo. A presença de anti-HBe indica uma diminuição da infecciosidade. No passado, o anti-HBe era considerado um indicador de recuperação ou ausência de infecciosidade da infecção pelo HBV. Estudos recentes descobriram que os soros anti-HBe positivos ainda podem ser infecciosos, mas são muito menos infecciosos do que os soros HBeAg positivos. Os mesmos resultados foram observados em estudos de transmissão de mãe para filho: 80-100% dos bebés nascidos de mães que foram ambos positivos para HBsAg e HBeAg foram infectados com HBV; enquanto os soros HBsAg-positivos foram de 10-2 a 10-5. Em contraste, apenas 3% dos bebés nascidos de mães HBsAg-positivas, anti-HBe positivas, foram infectados com HBV. Estes resultados sugerem que os soros HBeAg positivos são significativamente mais infecciosos do que os soros anti-HBe positivos; os soros anti-HBe positivos são também um pouco infecciosos [11].
Em geral, os doentes anti-HBe positivos têm níveis mais baixos de replicação do HBV nos seus soros e a sua doença tende a estabilizar e recuperar, mas uma proporção significativa de doentes anti-HBe positivos ainda pode ser vista clinicamente com doença flutuante ou em desenvolvimento. A principal razão para isto é que o HBV não é eliminado pela positividade anti-HBe, e o HBV ainda existe e replica-se no corpo. Um estudo mostrou que, na hepatite crónica activa anti-HBe positiva, o HBVDNA podia ser detectado no soro de 87% dos pacientes utilizando a técnica de PCR [10]. Os ensaios intra-hepáticos HBsAg e HBcAg e os estudos de hibridação in situ do HBVDNA constataram que 26,7% dos doentes com hepatite crónica positiva anti-HBe tinham replicação activa do HBV, 53,3% tinham replicação e expressão incompletas, e apenas 20% tinham um estado não replicante. A conversão serológica do HBeAg em anti-HBE na hepatite B crónica pode ser acompanhada por um aumento dos níveis de ALT e uma subsequente diminuição dos níveis de replicação do HBV, mas não significa uma eliminação completa do HBV [2, 10]. O HBeAg pode ser detectado no soro de portadores do HBV com histologia hepática normal, enquanto os doentes com presença histologicamente confirmada de hepatite crónica activa podem ter soro positivo para o anti-HBE, indicando que HBeAg não é necessariamente um marcador da actividade da hepatite B crónica e o anti-HBe não é um indicador de transporte saudável.
O anti-HBe não é geralmente positivo ao mesmo tempo que o HBeAg, mas se for detectado ao mesmo tempo, pode ser devido a diferentes subtipos (e1, e2, e3) de infecção; também é raro que o anti-HBe seja negativo ao mesmo tempo que o HBeAg. (3) alguns portadores do HBsAg adquiriram a síndrome de imunodeficiência e não conseguem formar anti-HBe [15].
5. anticorpo do núcleo de Hepatite B (anti-HBc)
O anti-HBc é um anticorpo que aparece cedo no sistema de anticorpos contra o HBV, e pode ser detectado 3-5 semanas após o aparecimento do HBsAg na infecção aguda pelo HBV e antes do aparecimento dos sintomas clínicos, e tem um alto título durante o período de recuperação da hepatite; quanto maior for o tempo de positividade do HBsAg, maior será o título de anti-HBc [2, 9]. Clinicamente, o anti-HBc é principalmente detectado pelo método de inibição competitiva como um anticorpo total, incluindo IgG, IgM, IgA e IgE tipo anti-HBc, com predomínio de anti-HBcIgM na fase inicial e com duração de 6 a 18 semanas, e anti-HBcIgG predominando mais tarde, que pode persistir no corpo durante anos ou mesmo décadas [11]. Normalmente, anti-HBc altamente potente, visto em portadores de hepatite aguda e crónica e HBsAg, e indica que a replicação do HBV pode ainda estar activa e o soro é infeccioso; anti-HBc de baixa potência indica infecção anterior pelo HBV e é geralmente não infeccioso.
Um único anti-HBc positivo é um padrão comum na prática clínica, cuja incidência varia de lugar para lugar com relatos que vão de aproximadamente 0,9 a 11,9%. Para a interpretação deste único anti-HBc positivo, os Centros de Controlo de Doenças dos EUA declaram [16]: após excluir os resultados do teste falso positivo (a supressão ≤70% é maioritariamente falso positivo), há várias razões: 1) recuperação precoce da infecção aguda (período de janela). O HBsAg é reduzido ou ausente, enquanto que os anti-HBs ainda não foram produzidos e o anti-HBc é o único indicador específico do HBV que pode ser detectado. (ii) A aquisição passiva de bebés anti-HBc. nascidos de mães portadoras de HBsAg, o tipo IgG anti-HBc da mãe pode ser transferido para o bebé através da placenta e tal anti-HBc materno pode estar presente no bebé durante mais de um ano; transfusão de sangue ou produtos sanguíneos anti-HBc-positivos. (iii) Infecção à distância com desaparecimento de anti-HBs. Isto porque os anti-HBc podem persistir por mais de 8 a 10 anos, enquanto que os anti-HBs só persistem no corpo por 6 meses a 3 anos. ④ Infecção à distância com baixos níveis de HBsAg. Nos últimos anos, tem sido sugerido que um único anti-HBc positivo é um sinal de infecção pelo vírus da hepatite C (HCV), e acredita-se que os antigénios do HCV têm o mesmo componente antigénico que o HBcAg. No entanto, um estudo prospectivo de Hoyos et al. sobre hepatite não-A não-B após transfusão de sangue em doentes submetidos a cirurgia cardíaca não apoiou esta visão [17-19].
Em resumo, os cinco marcadores séricos do vírus da hepatite B, que são apenas substâncias antigénicas expressas pelo gene do HBV e os correspondentes anticorpos produzidos por estes antigénios que estimulam o organismo, não são eles próprios componentes do ácido nucleico do vírus e, portanto, não são infecciosos em si mesmos, mas são apenas marcadores da infecção pelo HBV. Como um único HBVM positivo pode ser visto numa variedade de situações, e diferentes combinações de diferentes HBVM têm um significado clínico diferente, ao analisar o significado clínico dos “cinco testes da hepatite B”, é importante não analisar um deles isoladamente, mas referir-se aos outros testes, e por vezes ao HBVDNA. Os testes de DNA-P, Pre-S1, S2 e outros testes também devem ser tidos em conta numa análise clínica abrangente a fim de se fazer um julgamento correcto e uma avaliação precisa.
Determinação simples do significado clínico dos cinco testes da hepatite B: geralmente, entre os cinco marcadores séricos da hepatite B, se o marcador do antigénio viral (HBsAg/HBeAg) for positivo, indica a presença de infecção pelo vírus da hepatite B; se o antigénio e o anticorpo forem negativos, não há infecção viral; se o antigénio for negativo e um ou mais anticorpos forem positivos, indica infecção anterior ou período de recuperação e o vírus foi eliminado.
(ii) anticorpos contra o vírus da hepatite C (anti-HCV).
O período de incubação após a infecção pelo HCV é de 21-84 dias (média de 50 dias). O RNA do HCV pode ser detectado no sangue dentro de 1-2 semanas após a infecção, e a ALT do soro é elevada em média 50 dias. Os reagentes de teste anti-HCV continuaram a melhorar e foram agora desenvolvidos para a 3ª e 4ª geração, com maior sensibilidade e especificidade do teste. Embora a taxa de detecção de anticorpos tenha melhorado gradualmente, ainda existem deficiências, tais como o aparecimento tardio de anticorpos durante o curso da doença, em média 12 semanas após a infecção e várias semanas após a elevação de ALT. O anti-HCV só é detectável no soro de 50-70% dos doentes no momento do início dos sintomas, e até 90% do soro 3 meses após a infecção. Alguns doentes não desenvolvem anticorpos devido à imunodeficiência; os anticorpos também não distinguem entre infecções agudas, crónicas e anteriores, e os níveis de anticorpos carecem de consistência com a doença, pelo que não podem ser utilizados como indicador da gravidade da doença, do prognóstico e do tratamento.
1. método de ensaio.
Os testes para detectar anticorpos ao vírus da hepatite C foram registados pela primeira vez na US Food and Drug Administration (FDA) em 1990 e desde então, novas versões destes testes e outros testes anti-HCV aprovados pela FDA têm sido amplamente utilizados para diagnóstico clínico e rastreio de doentes assintomáticos. Os testes que se seguem são agora comummente utilizados na prática clínica.
(1), testes de despistagem anti-HCV: imunoensaios enzimáticos (HCV- EIA210; HCV- ELISA
310) e imuno-ensaio quimioluminescente melhorado (CIA).
(2) Testes de paracentese anti-HCV: Ensaio de immunoblotting recombinante (RIBA) – análise de resultados de testes de paracentese anti-HCV altamente específicos e detecção qualitativa/quantitativa do RNA do HCV por técnicas de PCR.
2. significado clínico.
(1), ensaio de rastreio Anti-HCV.
Resultados positivos: infecção actual pelo HCV, infecção anterior, falsos positivos.
Resultados negativos: sem infecção pelo HCV, janela de infecção pelo HCV, vestígios de infecção pelo HCV
(2), Ensaio de Imunoblotação Recombinante (RIBA) – Teste de paracentese altamente específico anti-HCV.
Resultados positivos: infecção actual pelo HCV, infecção anterior
Resultados negativos: ausência de infecção pelo HCV, janela de infecção pelo HCV, vestígios de infecção pelo HCV.
O significado clínico do anti-HCV deve ser determinado por uma combinação de testes de paracentese anti-HCV (teste de immunoblot recombinante (RIBA) – análise de resultados altamente específicos de testes de paracentese anti-HCV e detecção qualitativa/quantitativa do RNA do HCV por técnicas de PCR) e testes de função hepática.
3. tipos clínicos comuns.
(1) Teste de rastreio anti-HCV (+) + RIBA (+) + HCV RNA (+) + ALT/AST (+): apresentando infecção, hepatite activa.
(2) Teste de despistagem anti-HCV (+) + RIBA (+) + HCV RNA (+) + ALT/AST (-): infecção actual, transporte do vírus; hepatite inactiva.
(3) Teste de rastreio anti-HCV (+) + RIBA (+) + HCV RNA (-) + ALT/AST (+) excepto para outras causas: infecção actual, hepatite activa.
(4) Teste de rastreio anti-HCV (+) + RIBA (+) + HCV RNA (-) + ALT/AST (-): infecção anterior; rastreio de transporte de HCV, exigindo revisão regular.
(5) Teste de rastreio anti-HCV (+) + RIBA (-) + HCV RNA (-) + ALT/AST (+): falso positivo; outras causas de anomalias da função hepática.
(6) Teste de rastreio anti-HCV (+) + RIBA (-) + HCV RNA (-) + ALT/AST (-): falso positivo.
(7) Teste de rastreio anti-HCV (-) + RIBA (-) + RNA HCV (+) + ALT/AST (+): janela de infecção aguda; rastreio de infecção pelo HCV; hepatite oculta.
(8) Teste de rastreio anti-HCV (-) + RIBA (-) + HCV RNA (+) + ALT/AST (-): rastrear o transporte da infecção pelo HCV.
(9) Teste de rastreio anti-HCV (-) + RIBA (-) + RNA HCV (-) + ALT/AST (+): nenhuma infecção pelo HCV; outras causas de anomalias da função hepática
(10) Teste de despistagem anti-HCV (-) + RIBA (-) + HCV RNA (-) + ALT/AST (-): não infectado com HCV.
4. significado clínico da detecção qualitativa/quantitativa do RNA do HCV pela técnica de PCR.
(1), Clarificação da infecção e viremia.
(2), Diagnóstico precoce da hepatite aguda negativa do anti-HCV.
(3) Diagnóstico da hepatite crónica imunocomprometida anti-HCV-negativa.
(4), Lactentes de mães cronicamente infectadas com HCV para clarificar a transmissão de mãe para filho.
(5), indicação clara do tratamento antes da terapia antiviral e avaliação do resultado do tratamento após o tratamento.
(3), teste de anticorpos HIV (anti-HIV).
1.Testing métodos: Até agora, os testes serológicos continuam a ser a principal base para o diagnóstico laboratorial do VIH. O teste serológico, ou seja, o teste de anticorpos anti-HIV, é um método de rotina para o diagnóstico da infecção pelo VIH e está dividido em duas etapas: o teste de rastreio inicial e o teste de confirmação.
(1), teste de despistagem de anticorpos HIV: incluindo: ensaio de imunoabsorção enzimática (ELISA), teste de aglutinação de partículas de gelatina (PA), teste imunocromatográfico/permeação, teste rápido (RT), etc.
O teste ELISA-anti-HIV, é o teste mais antigo e mais amplamente utilizado para detectar anticorpos anti-HIV a nível internacional. Desde a primeira geração em 1985 até aos actuais kits de quarta e quinta geração, a sensibilidade e a especificidade melhoraram significativamente e o período de janela para a despistagem do VIH tem sido continuamente encurtado. Embora o teste ELISA-anti-HIV tenha alta sensibilidade e especificidade, há um pequeno número de falsos negativos e falsos positivos. Os falsos negativos ocorrem principalmente durante o período de janela ou tardiamente na doença quando os títulos de anticorpos caem; os falsos positivos são principalmente devidos aos efeitos da doença auto-imune, doença renal, doença hepática e vacinação, mas de um modo geral, os títulos de falsos positivos não são normalmente elevados.
(2). teste de confirmação de anticorpos anti-HIV.
Os testes de confirmação de anticorpos HIV incluem: immunoblot (Western Blot, WB); imunofluorescência (IFA); ensaio de imunoensaio em tiras (LIF); ensaio de radioimunoprecipitação (RIPA), etc. O teste de confirmação geralmente utilizado na China é o immunoblot (WB), que é altamente específico. A detecção de anticorpos específicos do VIH por ELISA (alta sensibilidade), juntamente com o WB (alta especificidade), tem uma precisão de diagnóstico superior a 99%, com uma taxa de falso-positivo de cerca de 0,00006%, resultando numa probabilidade quase nula de diagnóstico incorrecto.
2. diagnóstico da infecção pelo VIH no período de janela.
Anti-HIV negativo, não necessariamente nenhuma infecção, pode estar no período de janela da infecção viral, ou seja, o período desde a infecção do corpo pelo vírus HIV até à produção de anticorpos, a essência do período de janela é o processo de transformação de anticorpos virais específicos de nenhum para ter, de menos para mais, há dois factores que determinam a duração do período de janela, um é o grau de resposta dos anticorpos do corpo à infecção viral, o outro é a sensibilidade do método de detecção. A média é normalmente de 2 a 3 meses (pode ser de 1 a 9 meses), mas mais de 95% das pessoas infectadas pelo VIH-1 produzem anticorpos em menos de 6 meses. Os seguintes métodos são utilizados para o diagnóstico.
(1), teste de antigénios P24.
Após a infecção pelo VIH, o antigénio P24 é um marcador patogénico precoce que pode ser detectado no soro, que pode ser detectado cerca de 2~3 semanas após a infecção e entra no pico do antigénio cerca de 1~2 meses, depois com a produção de anticorpos para formar complexos antigénio-anticorpo, a concentração de antigénio P24 diminui para um nível que é difícil de detectar devido ao efeito neutralizante dos anticorpos. (2).
(2) Detecção do ARN do VIH.
A utilização da tecnologia PCR de biologia molecular pode detectar qualitativa e quantitativamente o ácido nucleico HIV (RNA HIV), que tem uma elevada sensibilidade e especificidade, e é de grande importância na detecção e diagnóstico precoce da infecção pelo HIV. Actualmente, os métodos de teste de ácido nucleico são comummente utilizados na prática clínica: transcrição reversa PCR (RT-PCR) e PCR quantitativa fluorescente em tempo real.
(iv) Anticorpos específicos do soro da sífilis (anti-TP)
1. testes serológicos para a infecção da sífilis.
O teste de anticorpos sífilis sérica é um método importante para o diagnóstico clínico da infecção pela sífilis. Quatro a seis semanas após a entrada da sífilis espiroqueta no corpo, podem ser produzidos anticorpos não específicos contra antigénios lipídicos e anticorpos específicos contra antigénios espiroquéticos da sífilis no soro. Os testes serológicos estão divididos em duas categorias principais de acordo com as características dos dois tipos de anticorpos produzidos pela espiroqueta de sífilis após a entrada no corpo.
(1) Testes serológicos para antigénios não sífilis espiroquetas: estes incluem: (1) o VDRL (teste laboratorial de investigação de doenças venéreas); (2) o USR (teste de reacção do soro não aquecido); (3) o RPR (teste rápido do anel plasmático de reacção); e (4) o TRUST (teste do soro vermelho não aquecido de toluidina). Actualmente, os métodos representativos mais utilizados são o RPR e o TRUST . São adequados para o rastreio da sífilis, observando a eficácia do tratamento, e para o rastreio da recidiva ou reinfecção.
(2) testes serológicos para antigénios espiroquetas da sífilis: (1) teste de aglutinação de partículas de gelatina da sífilis espiroqueta (TPPA); (2) teste de aglutinação de hematócitos da sífilis espiroqueta (TPHA); (3) teste de adsorção de anticorpos fluorescentes de anticorpos da sífilis espiroqueta (FTA-ABS); (4) ensaio de imunoabsorção enzimática ligada à sífilis espiroqueta (TP-ELISA); (5) teste de mancha proteica da sífilis espiroqueta (TP-WB).
O método de detecção de anticorpos específicos do soro da sífilis (anti-TP) nos nossos oito testes de infecção cirúrgica é o ensaio imunossorvente ligado à enzima sífilis espiroqueta (TP-ELISA) no teste serológico do antigénio espiroqueta da sífilis.
2. significado clínico do teste serológico do antigénio espiroqueta não sifilis.
(1), Positivo pode indicar: (i) infecção actual; (ii) recidiva ou reinfecção; (iii) falso positivo biológico.
(2) Utilização clínica para o rastreio da sífilis e observação da eficácia do tratamento antissífilis.
3. significado clínico do teste serológico do antigénio espiroqueta da sífilis.
(1), positivo indica: ① infecção actual; ② infecção anterior.
(2), Infectado com sífilis, o anticorpo espiroqueta da sífilis é positivo para toda a vida, portanto, não pode ser usado como indicador para avaliar a eficácia do tratamento.
(3), pode ser usado como teste de confirmação para testes serológicos de antigénio espiroqueta sem sífilis (por exemplo RPR, etc.) para espécimes positivos primários.
4. diagnóstico serológico da infecção da sífilis.
O teste serológico do antigénio espiroquetate não sífilis (por exemplo RPR, etc.) deve ser utilizado como teste de confirmação para o rastreio inicial de amostras positivas a fim de excluir falsos positivos biológicos; são necessários resultados positivos do teste serológico do antigénio espiroquetate sífilis para determinar se a infecção está presente, ou se se trata de uma infecção anterior ou de uma recorrência ou reinfecção, ou para avaliar a eficácia do tratamento anti-sífilis. Para ajudar.