O teste da tuberculose é o método mais específico para confirmar o diagnóstico de tuberculose e a deteção de bacilos da tuberculose na expetoração é a principal base para confirmar o diagnóstico de tuberculose. A baciloscopia com coloração antiácida é rápida e fácil na China, onde as micobactérias atípicas ainda são raras, pelo que o diagnóstico de tuberculose é basicamente estabelecido quando se encontram micobactérias do tipo antiácido. Os esfregaços espessos directos têm uma taxa de positividade melhor do que os esfregaços finos e são habitualmente utilizados. A microscopia de fluorescência é adequada para o exame rápido de um grande número de amostras. Na ausência de expetoração ou em crianças que não tossem, a lavagem gástrica matinal pode ser utilizada para procurar bacilos da TB, e reconhece-se que os bacilos também podem ser detectados por fibrinoscopia ou a partir do sumo do seu shabu. Uma expetoração positiva indica que a lesão está aberta e que a opinião é infecciosa. Se a quantidade de bacilos excretados for elevada (mais de 100.000 por ml), os esfregaços directos são facilmente positivos; para fontes socialmente infecciosas em quantidades menores de expetoração (menos de 10.000 por ml), existe o método de colheita. O método de cultura é mais exato e pode ser utilizado para testes de sensibilidade a fármacos e identificação de micótipos, para além de saber se o bacilo tem a capacidade de crescer e de se multiplicar. O crescimento do M. tuberculosis é lento e, normalmente, demora 4-8 semanas a registar-se utilizando o meio Roche modificado. A cultura é demorada, mas precisa, fiável e específica, sendo particularmente importante se a baciloscopia for negativa ou se o diagnóstico for duvidoso, e o teste de sensibilidade aos medicamentos das estirpes cultivadas pode fornecer uma referência para o tratamento, especialmente quando está indicado o retratamento. A amostra é amplificada in vitro pela reação em cadeia da polimerase (PCR), que amplifica a quantidade mínima de ADN contida no bacilo e é detectada por eletroforese. 1 bacilo contém aproximadamente 1 fg de ADN e 40 bacilos podem dar um resultado positivo. O método não requer uma pré-cultura in vitro, é altamente específico, pode ser registado em 2 dias, é rápido e simples e pode identificar o tipo de bacilo; a desvantagem é que podem ocorrer falsos positivos ou falsos negativos.