A fenilcetonúria é causada por uma diminuição da síntese de melanina devido à inibição da tirosinase, resultando numa cor de cabelo castanho pálido. A fenilcetonúria (PKU) é uma doença genética em que o metabolismo da fenilalanina está comprometido devido a uma deficiência ou atividade reduzida da fenilalanina hidroxilase (PAH) no fígado. É relativamente comum nas doenças hereditárias por deficiência do metabolismo dos aminoácidos. O diagnóstico da doença deve privilegiar o diagnóstico precoce, de modo a que se possa obter um tratamento precoce para evitar o atraso mental. O rastreio da fenilcetonúria deve ser efectuado em recém-nascidos para obter um diagnóstico precoce. 1) Métodos de rastreio: O método de rastreio de rotina internacionalmente aceite é o método de inibição bacteriana descoberto por Guthrie. Estão disponíveis na China kits de rastreio da PKU. Este método consiste em estimar o nível de fenilalanina no sangue com base no tamanho da banda de crescimento do Bacillus subtilis na cultura de pares de sangue da criança. Se o nível estimado de fenilalanina no sangue for de 0,24 mmol/L, o teste é positivo. Este método pode ser utilizado em bebés 3 a 5 dias após o nascimento. O rastreio neonatal é mais adequado para recém-nascidos com antecedentes familiares de fenilalanina. 2) Teste de carga de fenilalanina: Este teste permite uma visão direta da atividade da HAP. A dose de carga é de 0,1 g/kg de fenilalanina administrada por via oral durante 3 dias. Os níveis de fenilalanina no sangue são superiores a 1,22 mmol/L em crianças com PKU clássica e frequentemente inferiores a 1,22 mmol/L em casos ligeiros, sugerindo este último resultado que estas crianças podem ser hiperfenilalaninémicas sem PKU. Diagnóstico etiológico: O gene responsável pela fenilcetonúria é o gene da HAP, e o diagnóstico etiológico consiste na deteção de mutações no gene da HAP, que pode ser utilizado não só para o diagnóstico etiológico do doente, mas também para o diagnóstico pré-natal do feto. Existe uma correlação entre o genótipo e o fenótipo na maioria dos doentes. A medida em que os diferentes tipos de mutações afectam a atividade da HAP varia, pelo que a pesquisa de mutações no gene da HAP também pode ser útil para determinar o prognóstico e orientar o tratamento. Existem muitos métodos para detetar mutações no gene da HAP, mas a reação enzimática em cadeia multiplexada (PCR) é utilizada em combinação com um ou dois dos últimos testes, incluindo o polimorfismo de conformação de cadeia simples (SSCP), o polimorfismo de comprimento de fragmentos de restrição (RFLP), a eletroforese em gel com gradiente desnaturante (DGGE), a sequenciação direta do ADN, as sondas de oligonucleótidos específicas do local de mutação (ASO), a PCR-polipropileno amina eletroforese em gel – coloração com prata, impressão digital de didesoxi, sistema de amplificação-refractariedade-mutação (ARMS), métodos de lise enzimática não coincidente, etc. O ADN amplificado pode ser analisado e o ARN também pode ser analisado por SSCP. Os linfócitos do sangue periférico são utilizados para analisar espécimes e os corpos polares (produtos gaméticos) podem ser analisados para o diagnóstico pré-natal. A análise dos corpos polares e do ASO pode ser utilizada para o diagnóstico pré-natal, e o método ASO também pode ser utilizado para genes da HAP com loci de mutação conhecidos. Existem cinco mutações de HAP mais comuns na China: R243Q, Y204C, V399V, Y356X e R413P. Estas cinco mutações de HAP representam 56,7% de todas as mutações. Entre as mutações, as mutações pontuais foram as mais comuns, representando 77,4% dos tipos de mutação. Huang Shangzhi propôs um procedimento de diagnóstico rápido para as mutações da HAP: passo 1 para a análise da sonda de oligonucleótidos específica do local da mutação, a taxa de diagnóstico podia atingir 66%; passo 2 para a análise SSCP do exão 4, a taxa de diagnóstico aumentava para 80%; passo 3 para a análise SSCP de vários locais de mutação comuns, nomeadamente R243Q (exão 7), V339V e Y356X (exão 11), podia fazer uma taxa de diagnóstico de 87%. A deteção do gene PTPS é também baseada na PCR combinada com o método DGGE, que permite o rastreio das seis sequências codificantes deste gene e de todos os locais de splice do gene PTPS.