Muitos cientistas e empresas começaram recentemente a utilizar o ADN livre de tumores como um biomarcador para a deteção do cancro. No entanto, até à data, poucos estudos conseguiram encontrar ADN livre de tumores no cérebro e na espinal medula no sangue dos doentes. Agora, investigadores da Universidade Johns Hopkins afirmam ter detectado ADN livre de cancro no líquido cefalorraquidiano e os resultados do estudo foram publicados na revista Proceedings of the National Academy of Sciences. Investigadores detectam ADN livre de cancro no líquido cefalorraquidiano No estudo atual, os investigadores analisaram 35 casos de tumores do sistema nervoso central, incluindo seis meduloblastomas e 29 gliomas. Em primeiro lugar, os investigadores procuraram identificar mutantes celulares do tumor primário, cujo tecido foi recolhido durante a cirurgia do doente. Os investigadores começaram por utilizar a sequenciação orientada para encontrar mutantes em 13 tecidos tumorais, tendo depois identificado mutantes nos restantes tumores através da sequenciação do exoma. Em seguida, os investigadores encontraram mutações no líquido cefalorraquidiano (LCR) do tecido tumoral primário do doente utilizando a tecnologia de sequenciação SafeSeq-S desenvolvida em laboratório, que detecta mutações em alelos com uma precisão de 1%. Diferenças na detetabilidade do ADN livre de cancro Os investigadores detectaram níveis elevados de ADN tumoral do líquido cefalorraquidiano de 26 doentes com alelos mutantes altamente variáveis. Os autores sugeriram que o elevado grau de variabilidade entre as amostras pode ter tido origem em “factores biológicos ou de localização”. Outros estudos descobriram que a localização do tumor estava associada à detetabilidade do ADN do tumor no líquido cefalorraquidiano. Os tumores localizados perto do líquido cefalorraquidiano (LCR) tinham mais probabilidades de ter ADN livre de tumor detetável do que os tumores localizados noutros locais, não tendo sido detectado qualquer ADN tumoral no LCR de cinco doentes cujo tecido tumoral estava completamente rodeado pelo cérebro ou pela medula espinal e tendo sido detectado algum nível de ADN livre de tumor no líquido cefalorraquidiano de 24 doentes cujos tumores estavam localizados perto do cérebro. Para além da localização do tumor, os investigadores descobriram que os tumores de alto grau tinham mais probabilidades de ter ADN tumoral detetável no líquido cefalorraquidiano do que os tumores de baixo grau, enquanto os tumores de baixo grau tinham mais probabilidades de ter ADN tumoral detetável no líquido cefalorraquidiano. Os quatro doentes em que não foi possível detetar ADN tumoral no líquido cefalorraquidiano, mas cujo tecido tumoral estava localizado perto do líquido cefalorraquidiano, pertenciam todos a doentes com gliomas de baixo grau. A localização dos tumores nestes quatro doentes tornaria a cirurgia mais perigosa. Para o verificar, os investigadores sequenciaram o genoma completo do líquido cefalorraquidiano destes quatro doentes para determinar o ADN tumoral e compararam as mutações detectadas pelo genoma completo com as detectadas pelo SafeSeq-S. Os resultados mostraram que a sequenciação do exoma não conseguiu detetar as mutações detectadas pelo exoma. mutações do alelo do ADN tumoral do líquido cefalorraquidiano com uma probabilidade de 1%. Abrir a porta a estudos longitudinais de genes de tumores do líquido cefalorraquidiano como biomarcadores para aplicações clínicas Embora a descoberta do ADN de tumores do líquido cefalorraquidiano seja empolgante, os autores do estudo afirmam que existe uma necessidade urgente de técnicas mais sensíveis e não invasivas para avaliar os tumores do cérebro e da espinal medula. Por exemplo, cerca de 30% dos doentes com glioblastoma são submetidos a cirurgia por receio de uma recidiva do cancro, mas a cirurgia revelou-se desnecessária. Embora o ADN livre de tumor não tenha sido detectado a 100% no estudo atual, a sua sensibilidade foi igual ou superior à dos testes não invasivos para outras doenças malignas, e foi particularmente sensível para os tumores próximos do líquido cefalorraquidiano ou da superfície cortical. Em conclusão, os investigadores afirmam que este estudo é um “estudo exploratório” que abre a porta a uma investigação longitudinal sobre a utilização dos genes tumorais do líquido cefalorraquidiano como biomarcadores para ensaios clínicos.