As mulheres grávidas podem ser rastreadas para a síndrome de Down às 20 semanas de gravidez. O momento geral do rastreio da síndrome de Down é entre 15-20 semanas, sendo o melhor momento de 16-18 semanas, quando os resultados são mais precisos. É um teste importante durante a gravidez para determinar o risco de defeitos fetais congénitos e defeitos do tubo neural, medindo a concentração de alfa-fetoproteína, gonadotropina coriónica humana e estriol livre no soro da mãe, e tendo em conta a idade, peso e idade gestacional da mãe. Não é necessário ter o estômago vazio para o rastreio da síndrome de Down e pode beber água. No entanto, deve comer uma dieta leve e evitar alimentos oleosos e picantes. Antes do teste, é necessário fornecer informações pessoais detalhadas sobre a mulher grávida, incluindo o ano de nascimento, última menstruação, peso, se tem diabetes insulino-dependente, gravidezes gémeas, se fuma, e se tem um historial de gravidezes anormais. Durante o processo de rastreio, o médico dá um relatório que mostra uma condição de alto risco e a mulher grávida também precisa de fazer um teste de ADN não-invasivo ou uma amniocentese. Se já tiver mais de 20 semanas, não é recomendado fazer um teste de Down. As mulheres grávidas podem fazer um teste de ADN não invasivo nas 24 semanas após a gravidez, o que é mais preciso do que os resultados do teste de Down.