A incidência do cancro do colo do útero é mais elevada nos países em desenvolvimento e regiões atrasadas, com mais de 100.000 novos casos por ano na China e aproximadamente 500.000 novos casos em todo o mundo. As infecções transitórias por HPV são muito comuns e a maioria são eliminadas pelo soberbo sistema imunitário do organismo, enquanto que o risco de desenvolver neoplasia intra-epitelial cervical e cancro cervical é muito mais elevado na população em geral com infecção persistente por HR-HPV. O risco de desenvolver neoplasia intra-epitelial cervical e cancro do colo do útero é muito mais elevado após uma infecção persistente com HR-HPV do que na população em geral. O HPV é um vírus de DNA epiteliófilo fechado de dupla cadeia com um genoma de cerca de 7,9 kb, um peso molecular de 5×106 Daltons, um diâmetro de 50-55 nm, e sem envelope, que é um núcleo adormecido na natureza. O HPV é composto pela região da fase inicial (região E), a região da fase tardia (região L) e a região de controlo longo (LCR). Estudos em biologia molecular sugerem que a região E (E1, E2, E4-E7) de HPV contém as principais proteínas oncogenes E6 e E7. E6 bloqueia a apoptose inibindo P53, e E7 liga-se a pRb para desregular o ciclo celular, que é um mecanismo molecular importante para o desenvolvimento do cancro. O núcleo é simétrico e de 20 lados, constituído por 72 capsids, que são compostos por duas grandes proteínas capsids, L1 e L2, codificadas pela região L, das quais L1 representa cerca de 80% das proteínas capsids, é altamente conservado, altamente específico, tem múltiplos epitopos antigénicos, pode induzir anticorpos neutralizantes em animais, e é frequentemente utilizado como antigénio alvo para vacinas profilácticas e é um componente importante no desenvolvimento de vacinas. É menos abundante, mais variável e pode produzir reactividade cruzada. A região LCR não tem capacidade de codificação e contém muitos sítios de ligação transcripcional celular que regulam a transcrição e replicação viral. Características de genotipagem e patogenicidade do HPV 1. A patogenicidade do HPV está relacionada com os seus subtipos Actualmente, mais de 200 espécies de HPV são identificadas para carcinoma cervical in situ e carcinoma invasivo, principalmente com base na homologia do ADN da região L1 no genoma viral. Cerca de 40 destes subtipos podem infectar o tracto genital. São classificados vários tipos de HPV de alto risco com potencial oncogénico para cancro do colo do útero. Os tipos de alto risco referidos na literatura anterior contêm basicamente todos 17 tipos, incluindo 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 73 e 82, mais genótipos oncogénicos não classificados 6, 11 e outros. Não há consenso sobre a categorização de alguns genótipos. Estudos demonstraram que a infecção com tipos de HPV de alto risco pode levar a tumores malignos do tracto reprodutivo. No cancro do colo do útero, a infecção persistente com HPV 16 e HPV 18 é mais comum, e o HPV 16 em particular é mais comum e tem um risco significativamente maior de causar lesões cervicais do que outros tipos de alto risco. HPV-18 é outro tipo comum de HPV de alto risco e é mais comumente visto no adenocarcinoma. Estudos sobre tipos de alto risco mostram actualmente que entre os tipos de baixo risco HPV, HPV6 e HPV11 não estão geralmente associados a lesões malignas e estão associados à grande maioria das verrugas genitais no ânus. Estudos anteriores mostraram que os tipos positivos de HPV de alto risco sugerem duas condições: um risco elevado de CIN e cancro do colo do útero pré-existentes; e um risco acrescido de CIN e cancro do colo do útero nos próximos 10 anos, enquanto valores preditivos negativos para o HPV sugerem um risco reduzido de cancro do colo do útero. 2. evidências epidemiológicas genéticas sobre o mecanismo da carcinogénese do HPV e a susceptibilidade ao cancro do colo do útero Estudos realizados no país e no estrangeiro concordam quase unanimemente que a infecção pelo HPV não é necessariamente cancerígena e que leva 5-10 anos desde a infecção pelo HPV até ao desenvolvimento do cancro do colo do útero, durante os quais a imunidade do corpo é reforçada e o vírus pode diminuir por si só em 80% dos doentes infectados, especialmente em mulheres jovens, e que o risco de doença depende principalmente de subtipos específicos de HPV, e que uma série de transições pode ocorrer durante o processo Uma série de transições pode ocorrer durante este processo, e pode-se argumentar que o cancro do colo do útero é um resultado adverso raro de uma infecção comum. Estudos sugerem que o vírus entra nas células da camada basal do epitélio através de uma micro-incisão na mucosa do tracto genital. Uma vez que o HPV entrou nas células basais, o capsido viral solta-se e o ADN circular entra no núcleo, onde se replica no núcleo da célula hospedeira. A replicação de DNA livre de vírus em células basais está relativamente regulada e esta replicação depende da diferenciação das células epiteliais. A infecção dominante ocorre quando as células infectadas com HPV começam a diferenciar-se e a mover-se para cima dentro da camada epitelial, altura em que é produzido um grande número de cópias do gene HPV, dependendo de uma maior diferenciação das células epiteliais. O vírus começa a auto-montagem, completa a montagem nas células epidérmicas e liberta partículas virais intactas, que podem ser encontradas na superfície da pele quando as células epidérmicas são derramadas. o nível de HPV-DNA aumenta com a gravidade da lesão cervical e é acompanhado por um aumento do risco de carcinogénese com o aumento da carga viral. Testes clínicos de HPV e rastreio do cancro do colo do útero Para melhorar a prevenção e tratamento precoce do cancro do colo do útero, é crucial concentrar-se no rastreio e nos métodos de rastreio do cancro do colo do útero. Com a implementação generalizada da prevenção secundária do cancro do colo do útero, estão a surgir novas tecnologias de rastreio. Existem actualmente três testes disponíveis, o método tradicional PapSmear (PapSmear), que foi significativamente reduzido na aplicação e ainda é utilizado em algumas áreas menos desenvolvidas economicamente, e a citologia de base líquida (ThinPreppaptest), que foi desenvolvida ao longo dos últimos 10 anos ou mais, ambos com uma especificidade relativamente elevada na prática de rastreio; no entanto, devido aos métodos de teste subjectivos, é impossível evitar Os factores humanos têm limitado o seu desenvolvimento e promoção. O teste de tipagem clínica HR-HPV, que é agora amplamente respeitado internacionalmente, foi amplamente aceite e incorporado no rastreio primário do cancro do colo do útero porque tem um melhor valor preditivo negativo, é um teste objectivo, está menos sujeito a factores humanos, e é mais reprodutível. Os EUA foram o primeiro país a utilizar o teste HPV para o rastreio do cancro do colo do útero, e em 2003 a US Food and Drug Administration (FDA) aprovou o teste HPV-DNAHC2 em combinação com a citologia de base líquida para o rastreio primário e o rastreio do cancro do colo do útero em mulheres com mais de 30 anos de idade. 2012 a American Cancer Society ASC, a American Society for Colposcopy and Cervical Pathology (ASCCP) e a American Society for Clinical Pathology (ASCP ) recomendou a utilização de citologia do colo do útero combinada com testes HPV de alto risco como rastreio do cancro do colo do útero numa população de mulheres com idades compreendidas entre os 30 e os 65 anos para maximizar a sensibilidade do rastreio do cancro do colo do útero. em Abril de 2014, a FDA adoptou a primeira aplicação do teste HPV apenas para rastrear o cancro do colo do útero em mulheres com mais de 25 anos de idade, uma abordagem que poderia ter um impacto directo na popularidade da citologia no rastreio do cancro do colo do útero, realçando a importância do rastreio de alto risco Testes de HPV no rastreio do cancro do colo do útero. Existem dois métodos principais de teste de HR-HPV comummente utilizados na China nesta fase, um é a captura de hibridação mais madura (HC2) amplamente utilizada para a detecção quantitativa de HR-HPVDNA; o outro é o teste de tipagem HPV utilizando uma combinação de reacção em cadeia da polimerase (PCR) e a tecnologia de hibridação inversa de pontos (RDB) do chip genético. Ambos são amplamente utilizados no rastreio e acompanhamento de doenças cervicais, uma vez que fornecem informações diferentes sobre a infecção por HPV no tracto genital do sujeito. 1. teste HC2: um teste qualitativo de hibridação in vitro do ácido nucleico HPV baseado no princípio da amplificação do sinal utilizando técnicas de captura de anticorpos e de sinalização química fluorescente e sondas à escala do genoma. Este método detecta o nível global de ADN para 13 tipos de HPV de alto risco (16, 18, 31, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68). estudos de rastreio combinado HR-HPVDNAHC2 e citologia mostraram uma maior taxa de concordância positiva e exactidão entre o protocolo combinado e os resultados da patologia, reduzindo a taxa de diagnósticos perdidos. 2. teste de genotipagem de HPV: O princípio é tomar células esfoliadas cervicais, amplificar in vitro o ADN das células do tecido por PCR, e depois utilizar o kit de teste de tipagem de amplificação de ácido nucleico HPV, utilizando o instrumento de hibridação rápida molecular do ácido nucleico como plataforma, de acordo com o princípio da hibridação importada para fazer o cruzamento da molécula alvo na membrana do chip genético de baixa densidade que foi fixada com sondas de ácido nucleico, para uma hibridação rápida. O HPV é transmitido sexualmente, mas também pode ser transmitido por outras vias. A transmissão potencial do HPV pode incluir transmissão vertical e contaminação ambiental (incluindo transmissão médica). Além disso, idade, educação, ocupação, rendimento económico, métodos contraceptivos, número de gravidezes, modo de parto, número de nascimentos, e co-infecção com outras infecções do tracto reprodutivo podem estar todos associados à infecção por HPV. Nos últimos anos, o foco da investigação sobre o HPV deslocou-se para a relação entre idade e carga viral e a gravidade das lesões cervicais. Dados de grandes amostras de inquéritos epidemiológicos mostram que as mulheres perimenopausais também têm uma maior prevalência de infecção por HPV de alto risco.