1. teste de mutação EGFR População alvo: o teste de mutação EGFR é recomendado para todos os doentes com diagnóstico patológico de adenocarcinoma pulmonar, NSCLC com um componente de adenocarcinoma e diferenciação de adenocarcinoma, e é recomendado para doentes com pequenas biópsias ou não fumadores [cancros]. Requisitos laboratoriais: O laboratório que realiza o teste de mutação EGFR deve ser acreditado. O operador deve ser um técnico treinado e deve existir um sistema de gestão da qualidade do laboratório para assegurar a exactidão dos resultados do teste. Tipos de amostras e manipulação: As amostras de tecido excisadas cirurgicamente e biopsiadas são os tipos mais comuns de amostras utilizadas para o teste de mutação EGFR e recomenda-se que as amostras de tecido sejam preferidas para testes e que amostras de tecido normalizadas possam satisfazer os requisitos de teste. As amostras de tecido primário e metastático podem ser utilizadas para os testes de mutação EGFR, tal como as amostras citológicas. O tratamento de diferentes amostras deve ser normalizado. As amostras de tecido devem ser fixadas em formalina neutra tamponada a 10%, evitando fixadores ácidos e os que contêm iões metálicos pesados. As amostras de biopsia devem ser fixadas durante 6-12 horas e as amostras de ressecção cirúrgica devem ser fixadas durante 6-48 horas. As secções de tecido tumoral devem ser revistas pelo patologista para avaliar o conteúdo de células tumorais e, se necessário, a área de tecido tumoral deve ser marcada ao microscópio para corte manual e raspagem, para assegurar que estão disponíveis células tumorais suficientes para extracção de ADN. Deve ser feita uma nova recolha. Devem ser adoptadas medidas para evitar a contaminação cruzada de tecidos de um caso para outro. O manuseamento e controlo de qualidade destas amostras deve ser da responsabilidade de um patologista experiente e todas as amostras devem ser testadas no mais curto espaço de tempo possível. Métodos de detecção de mutações EGFR: Actualmente, os métodos mais utilizados para a detecção de mutações EGFR são sistemas de supressão directa de mutações de sequenciação e amplificação. Recomenda-se a utilização de um kit de teste de mutação EGFR aprovado para comercialização pelas autoridades. O relatório do teste deve incluir informação pessoal básica sobre o doente, número de registo médico, diagnóstico patológico, tipo de amostra, conteúdo de células tumorais (por exemplo, número ou percentagem de células tumorais), método de teste, resultados do teste, juntamente com a data de recepção da amostra e a data do relatório, e deve ser revisto e emitido pelo operador do teste e por outro médico experiente. O tipo de mutação basal EGFR no resultado do teste é nomeado de acordo com a Sociedade Internacional de Nomenclatura da Variação do Genoma Humano. Tratamento de pacientes com mutações sensíveis ao EGFR em tratamento avançado NSCLC Primeira linha: Recomenda-se o tratamento de primeira linha com medicamentos EGFR-TKI para pacientes com mutações sensíveis ao EGFR. Terapia de segunda linha: A terapia baseada em EGFR-TKI é recomendada na segunda linha para pacientes com mutações sensíveis a EGFR que não tenham sido previamente tratados com terapia baseada em EGFR-TKI. Terapia de manutenção: Os pacientes com mutações sensíveis a EGFR que beneficiaram de quimioterapia de primeira linha podem ser tratados com terapia de manutenção baseada em EGFR-TKI. População alvo: o teste do gene de fusão ALK é recomendado para todos os pacientes com diagnóstico patológico de adenocarcinoma pulmonar, NSCLC com um componente de adenocarcinoma e diferenciação de adenocarcinoma. Requisitos laboratoriais: os mesmos que para os testes de mutação EGFR nesta directriz. Tipo de espécime: Espécimes histológicos ou citológicos de locais de tumores primários ou metastáticos são aceitáveis para testes de fusão ALK e os requisitos de manuseamento do espécime são os mesmos que para testes de mutação EGFR nesta directriz. Independentemente do tipo de amostra utilizada, devem ser asseguradas células tumorais suficientes e os tecidos e células não tumorais devem ser excluídos na medida do possível. A espessura das secções da parafina deve ser (5±1) μm e devem ser tomadas medidas para evitar a contaminação cruzada de tecidos de um caso para outro. O manuseamento e controlo de qualidade destes espécimes deve ser da responsabilidade de um patologista experiente. Todos os espécimes devem ser testados no mais curto espaço de tempo possível. FISH é o método clássico de detecção de genes de fusão ALK, e foi aprovado pela US Food and Drug Administration como método de diagnóstico complementar do EML4-ALK positivo NSCLC na altura do lançamento do crizotinibe. RT-PCR foi capaz de detectar de forma sensível tipos conhecidos de genes de fusão. A plataforma tecnológica chinesa IHC aprovada pela FDA tem um elevado grau de concordância com a FISH. Recomendações: A tecnologia FISH com a designação de sonda separada, as plataformas tecnológicas RT-PCR e IHC aprovadas com autoridade podem ser utilizadas para detectar genes de fusão ALK. Outras plataformas de testes IHC podem ser utilizadas como rastreio primário para genes de fusão ALK e recomenda-se a confirmação por FISH ou RT-PCR. O método de teste e a plataforma de teste precisam de ser indicados no relatório do teste, e o método FISH precisa de indicar o número de células tumorais e a percentagem de células positivas. Consultar a secção de teste do gene EGFR para informações básicas sobre pacientes e espécimes, etc. 4) Tratamento para doentes com o gene de fusão ALK positivo NSCLC Recomendação: Os doentes com o gene de fusão ALK positivo NSCLC avançado podem ser tratados com crizotinib. A descoberta destes dois alvos, EGFR e ALK, e o desenvolvimento de medicamentos relacionados trouxeram o tratamento do NSCLC para a era do tratamento individualizado baseado em alvos moleculares, e o teste e tratamento para estes alvos é de grande importância. O Comité de Peritos actualizará regularmente esta directriz à medida que surjam novos resultados de investigação.