O melhor momento para ter uma segunda ecografia 4D é entre 22-26 semanas de gestação, principalmente para examinar o feto para detectar anomalias de desenvolvimento. Isto é normalmente quando a anatomia fetal foi formada, o volume do líquido amniótico é moderado e a ecografia 4D revela imagens claras e fáceis de ver, tornando fácil o rastreio preciso de anomalias fetais importantes. Durante a segunda ecografia 4D, o primeiro passo é avaliar o comprimento do feto e estimar se está a crescer de acordo com a semana gestacional. Em segundo lugar, o feto será examinado um a um para ver se existem quaisquer anomalias tais como lábio leporino e palato fendido, espinha bífida, e se o cérebro, coração, rins e outros órgãos vitais se estão a desenvolver normalmente. Finalmente, a placenta, a posição do cordão umbilical e o volume de líquido amniótico serão observados para ver se estão normais. Se o feto estiver mal posicionado ou se os membros obscurecerem o rosto durante a ecografia 4D, o que não é conducente à observação, a grávida não precisa de se preocupar demasiado e pode envolver-se em actividades como caminhar e subir escadas para promover o movimento do feto no útero e mudar a sua posição, e depois repetir o teste novamente. Se os resultados do teste mostrarem que o feto pode ter malformações, tais como anomalias faciais fetais ou do sistema digestivo, o feto terá de ser tratado em conformidade sob supervisão médica.