Uma vez que a duração do ciclo menstrual natural varia de pessoa para pessoa e de ciclo para ciclo na mesma doente, não é fácil organizar o momento da extração dos óvulos. Além disso, no ciclo natural só se desenvolve um folículo dominante, só se pode formar um embrião após a fertilização e a taxa de gravidez da transferência de um embrião é muito baixa. Por conseguinte, é necessária uma superovulação controlada para aumentar e melhorar a função ovárica, a fim de atingir o objetivo de obter vários óvulos saudáveis sem as limitações do ciclo natural, fornecer vários embriões para transferência e sincronizar, tanto quanto possível, o desenvolvimento do corpo lúteo com a função do endométrio. Os passos da FIV são os seguintes: 1) Quando as contra-indicações são excluídas e as indicações são confirmadas no ambulatório do Centro de Reprodução, dirija-se à sala de registo no 7º andar do ambulatório com o cartão de registo de FIV emitido pelo médico, e prepare os três certificados (bilhete de identidade de ambas as partes, certidão de casamento e certidão de nascimento) e entregue-os à enfermeira da sala de registo para verificação. 2 . De acordo com a ordem de teste de laboratório emitida pelo médico, conclua o pré-exame para fertilização in vitro e envie o resultado para a enfermeira na sala de registro o mais rápido possível. 3.Os casais em fase de pré-ciclo devem marcar hora para vir ao centro o mais cedo possível para ouvir a aula de educação pré-IVF. (Todos os sábados de manhã, das 10 às 12 horas). 4. normalmente no 20º-21º dia da menstruação, vir ao centro para o transplante experimental e utilizar o protocolo de superovulação controlada de acordo com a condição da paciente. 5. superovulação controlada: Geralmente, GnRHa é usado para reduzir o FSH e LH no corpo, e então HMG ou FSH drogas de ovulação são administrados para estimular o crescimento de folículos nos ovários, e a dosagem de drogas é ajustada de acordo com a capacidade de resposta do paciente às drogas, e o número de ovos obtidos varia dependendo da idade do paciente e da dosagem das drogas. 6) Monitorização dos folículos: Para avaliar o efeito da estimulação ovárica e decidir o momento da colheita de óvulos, as pacientes devem dirigir-se ao sétimo andar da clínica ambulatória para um acompanhamento atempado, de acordo com as instruções do médico (normalmente antes das 9h00), e monitorizar o tamanho dos folículos através de ecografia vaginal, e fazer análises hormonais ao sangue para ajustar a dosagem da medicação. Quando um ou dois ou mais folículos têm mais de 1,8 cm de diâmetro e o número de folículos acima de 1,4 cm é comparável ao valor de E2, pode ser injectada gonadotropina coriónica humana (hCG) para promover a maturação folicular. A recuperação do óvulo é feita 34~36 horas após a injeção de hCG. 7) Recolha de óvulos: Geralmente, sob injeção analgésica ou anestesia intravenosa e guiada por ultra-sons, a agulha de recolha de óvulos é passada através do fórnix vaginal e os óvulos são imediatamente transferidos para a placa de Petri contendo solução de cultura de embriões ao microscópio, sendo depois colocados na incubadora a 37°C para cultivo. 8. recolha de esperma: A altura da recolha de esperma é o mesmo dia que o dia da recolha do óvulo. Lavar as mãos antes da recolha de esperma e reter o sémen através do método de masturbação. O pequeno copo fornecido é estéril, não tocar no rebordo ou no interior do copo durante a retenção. O sémen extraído é processado pelo método upstream ou por centrifugação com gradiente de densidade Percoll. 9) Fertilização in vitro: colocar os espermatozóides e os óvulos tratados na mesma placa de Petri 4 a 5 horas após a recolha dos óvulos e incubá-los durante 18 horas, podendo a fertilização ser observada ao microscópio. Se a qualidade do esperma for demasiado fraca para permitir a fertilização natural, a fertilização deve ser forçada por microinjecção (ver microfertilização intracitoplasmática de esperma único). 10. Transferência de embriões: Os óvulos fertilizados podem ser cultivados in vitro durante 48-72 horas para se desenvolverem em embriões com 8-16 células. Nesta altura, o número de embriões a transferir é determinado pela idade da paciente, pela gravidez anterior e pela qualidade dos embriões, e os embriões extra podem ser congelados e armazenados. A transferência de embriões não requer anestesia. Atualmente, os embriões são normalmente transferidos 2-3 dias após a fertilização. 11) Suplementação hormonal após a transferência de embriões: atualmente, a progesterona é administrada principalmente por injeção para apoiar o corpo lúteo. 12 . Teste de HCG na urina e no sangue pela manhã no 14º dia após a transferência do embrião para determinar se há gravidez. No 28º dia após a gravidez, o ultrassom verificará o número de fetos e o local de implantação do embrião.