Desde o seu início, a tecnologia FIV passou pela primeira geração de inícios, a segunda geração de actualizações, e a terceira geração de mudanças. Esta tecnologia reprodutiva tem continuado a amadurecer e a melhorar com os avanços da medicina. A terceira geração de tecnologia de FIV é um avanço intergeracional na medicina genética humana. A FIV convencional (primeira geração de FIV) resolve eficazmente problemas de infertilidade devido a factores femininos, tais como problemas tubais, endócrinos e uterinos. A FIV de segunda geração (ICSI) aborda os problemas de infertilidade devidos a factores masculinos. A tecnologia de FIV de terceira geração (PGD) é uma inovação revolucionária baseada na FIV e ICSI, conhecida como diagnóstico genético pré-implantação, que melhora muito os problemas de fertilidade das pessoas com problemas cromossómicos, previne a transmissão de doenças genéticas, selecciona blastocistos saudáveis para transferência, e também melhora muito a taxa de sucesso da transferência.
O que é a tecnologia PGD para FIV de terceira geração?
A técnica PGD permite o teste de embriões/blastocistos que foram criados e formados. O risco é muito menor. Por conseguinte, é melhor escolher uma clínica de FIV equipada para cultivar ovos fertilizados para blastocisto antes de fazer o rastreio de PGD.
O rastreio PGD utiliza a hibridação fluorescente in situ, onde cada cromossoma tem uma região única de ADN que está presente apenas nesse cromossoma em particular. Quando uma pequena sonda de ADN entra em contacto com essa região de ADN, pode ser utilizada para reconhecer estes padrões únicos e fluorescência ou brilho. Cada sonda pode emitir luz em várias cores diferentes, permitindo que vários cromossomas (ou regiões de cromossomas) sejam testados ao mesmo tempo. Esta técnica é conhecida como hibridação in situ da fluorescência FISH. À medida que a tecnologia PGD continua a amadurecer, o sucesso da tecnologia FISH interfásica de células únicas nucleares e o desenvolvimento de uma grande variedade de sondas FISH alargou a PGD ao diagnóstico de doenças cromossómicas, permitindo a identificação muito eficaz de embriões/blastocistosos portadores de doenças cromossómicas e genéticas do ADN.
Onde pode ser feito o PGD para FIV de terceira geração
As condições experimentais para o DGP são muito exigentes e qualquer pequeno erro no procedimento pode levar a graves consequências clínicas. Alguns hospitais na China são capazes de realizar PGD, mas apenas para algumas das doenças, e até 125 doenças genéticas e cromossómicas.
Em termos de segurança e saúde, a técnica do PGD dos EUA é a mais segura. O PGD normalmente realizado não resulta num aumento de defeitos congénitos ou variantes cromossómicas. O PGD é realizado antes do material genético do embrião estar activo, todas as células dentro do embrião são idênticas e cada célula é capaz de se desenvolver em qualquer parte do feto, e a extracção da única célula utilizada como teste não tem qualquer efeito. No entanto, quando a tecnologia não é perfeita, existe um elevado risco de que a extracção de células possa ser defeituosa, resultando numa actividade reduzida ou mesmo na morte do embrião/blastocisto. DR. Richard Buyalos, M.D., um dos principais centros de fertilidade nos Estados Unidos, aconselha que mesmo quando o rastreio do DGP é feito nos Estados Unidos, a tecnologia não está disponível em todo o lado, mas está limitada a alguns grandes laboratórios nos Estados Unidos que são qualificados para a executar, e os pacientes não devem ouvir as alegações de embalagem feitas por algumas instituições.
Devido às actuais tendências sociais, o número de pessoas que casam tarde e têm filhos tarde está a aumentar, e o número de mulheres mais velhas que dão à luz permanece elevado. Neste ambiente, a importância da tecnologia do PGD é evidente, uma vez que as anomalias cromossómicas estão a tornar-se mais frequentes com a idade e a deteriorar as condições de vida. Com base na primeira e segunda gerações, a FIV de terceira geração desempenha um papel muito importante na eliminação de blastocistos doentes e na selecção de blastocistos saudáveis e de alta qualidade para a implantação, o que pode melhorar muito a taxa de sucesso da gravidez e, ao mesmo tempo, assegurar que a criança nasça um bebé saudável e alcance resultados eugénicos.
Grupos de aplicação.
Diagnóstico genético pré-implantação, identificação cromossómica, FIV de terceira geração) podem detectar uma vasta gama de doenças, incluem anomalias cromossómicas, defeitos genéticos únicos ou distúrbios ligados ao sexo. Estes incluem:
Cromossoma 13: As anomalias do cromossoma 13 ocorrem na trissomia do cromossoma 13 (síndrome de Patau) com uma prevalência de cerca de 1 em 5.000, e são causadas por um cromossoma 13 extra, com múltiplas malformações e a maioria das mortes nos três anos seguintes ao nascimento. Doença renal policística (grandes quistos nos rins), disfunções intestinais.
Cromossoma 18: A trissomia 18 é uma anomalia cromossómica grave com uma prevalência de cerca de 1 em 6.000, e os pacientes com trissomia 18 têm geralmente múltiplos defeitos orgânicos e morrem no primeiro ano de vida. Causa frequentemente a doença de Niemann (anemia, fígado aumentado, baço, gânglios linfáticos, dispepsia e defeitos neurológicos, cancro do pâncreas, etc.).
Cromossoma 21: Síndrome de Down
Cromossoma 22: Mieloblastoma crónico devido à substituição da medula óssea por glóbulos brancos malignos.
Cromossoma X: Distrofia muscular de Duchenne (DMD), síndrome de Turner, síndrome do X Frágil
Cromossoma Y/leucemia mielóide aguda
O tipo normal de cromossoma feminino é XX e o cromossoma masculino é XY. As anomalias cromossómicas sexuais são mais comuns, ocorrendo em cerca de 1 em 500 casos, e os especialistas acreditam que cerca de 25% dos abortos espontâneos são devidos a anomalias cromossómicas sexuais. Seguem-se três tipos comuns de anomalias cromossómicas sexuais.
Síndrome de Tul’ner (síndrome da ausência congénita dos ovários) Com uma incidência de 1 em 10.000 bebés do sexo feminino, é a principal causa de anomalias cromossómicas que levam ao aborto espontâneo. A menina não tem dois cromossomas X e apenas um cromossoma X: 45X. Ela cresce para ser baixa, tem um pescoço anormal, hipogonadismo, ovários anormalmente pequenos e tem frequentemente doenças cardíacas e renais. Estes sintomas não são frequentemente detectados até ao desenvolvimento pubertário. O cariótipo é 45,X.
Klinefeher syn-drome (hipoplasia testicular congénita) tem uma incidência de cerca de 1 em 1000 bebés do sexo masculino e caracteriza-se sobretudo por um rapaz que atinge a puberdade muito alta e com membros longos e finos. A criança tem um cromossoma X redundante com um cariótipo de 47XXY e apresenta-se frequentemente com hipogonadismo, pequenos testículos, que são incapazes de produzir esperma e são, portanto, inférteis. O pêlo púbico é feminino, a barba, os pêlos axilares e os pêlos púbicos são escassos, não há nódulos laríngeos, a pele é fina e alguns pacientes masculinos têm seios femininos.
A disgénese gonadal mista (MGD), também conhecida como dispareunia XO/XY, é uma combinação, caracterizada sobretudo pelo clitóris alargado do paciente. O grau de desenvolvimento sexual afecta o desenvolvimento dos órgãos genitais internos e externos.
A síndrome XXX (síndrome de trissomia x) é a anomalia cromossómica mais comum nas fêmeas. Os cariótipos cromossómicos na síndrome XXX são 47, XXX; 48,XXXX, etc. O número de cromossomas está correlacionado com a gravidade dos sintomas, quanto mais cromossomas X, mais graves são os sintomas.
A síndrome do X Frágil (Cromossoma X Frágil) é a causa mais comum de atraso mental nos homens e caracteriza-se por uma testa saliente, uma mandíbula saliente, orelhas grandes, mãos grandes e um distúrbio da fala, e uma personalidade retraída. O cariótipo é 46, Fra(x)Y.
Vantagens.
(Diagnóstico genético de transferência pré-embrionária, identificação cromossómica, FIV de 3ª geração) É seguro?
Sim. O PGD é realizado antes do material genético do embrião estar “activo” porque é feito tão cedo que todas as células dentro do embrião ainda são idênticas e cada célula é capaz de se desenvolver em qualquer parte do feto. A remoção de células de um embrião precoce não altera a capacidade do embrião de evoluir para uma gravidez normal completa.
Qual é a exactidão de (diagnóstico genético pré-implantação, identificação cromossómica, FIV de terceira geração)?
Embora os testes genéticos sejam um importante instrumento de diagnóstico, não estão sem as suas limitações. A análise genética unicelular é tecnicamente exigente e propensa a uma série de erros. Os testes genéticos de hibridação fluorescente in situ (PGD-FISH) só podem testar para um número limitado de cromossomas e não podem detectar o resto dos cromossomas anormais. Os testes de genes de reacção em cadeia da polimerase (PGD-PCR) podem, por vezes, não detectar defeitos genéticos individuais. Para translocações cromossómicas, os testes genéticos não podem detectar cromossomas que não sejam os cromossomas anormais que se sabe estarem envolvidos na translocação. A taxa de erro dos testes genéticos para anomalias cromossómicas é de aproximadamente 10%. No caso dos cromossomas quiméricos, o gene anormal específico pode estar presente numa célula do embrião mas não na outra, o que muitas vezes é insuficiente para o diagnóstico genético. Por outro lado, devido às limitações do diagnóstico genético, podem existir diagnósticos que mostram que todos os embriões são anormais, quando na realidade um deles pode ser normal
Quais são os benefícios do PGD (Diagnóstico Genético Pré-implantação, Identificação Cromossómica, FIV de Terceira Geração)?
O PGD (Diagnóstico Genético Pré-implantação, Identificação Cromossómica, FIV de Terceira Geração) é um teste que analisa embriões normais nas áreas acima do embrião que são mais susceptíveis à variação cromossómica. O rastreio PGD (Diagnóstico Genético Pré-implantação, Identificação Cromossómica, FIV de Terceira Geração) dá aos embriões uma maior probabilidade de nascerem no útero, menos mortalidade natural e reduz o risco de ter descendentes com cromossomas anormais (por exemplo, síndrome de Down, etc.) A tecnologia PGD (Diagnóstico Genético Pré-implantação, Identificação Cromossómica, FIV de Terceira Geração) reduz a incidência de tragédias genéticas A tecnologia PGD permite O PGD permite aos embriologistas diagnosticar se um embrião é portador de um gene para uma doença genética antes de ser implantado durante o procedimento de FIV. O rastreio de embriões geneticamente anormais através do DGP pode aumentar a taxa de implantação de embriões saudáveis e reduzir a incidência de abortos espontâneos e anomalias cromossómicas triplóides
PGD (diagnóstico genético pré-implantação, identificação cromossómica, terceira geração de FIV) rastreio sexual/sexo?
Cada gravidez tem 50% de hipóteses de ser masculina e 50% de ser feminina, mas algumas famílias têm mais filhos do mesmo sexo. A utilização do PGD pode ajudar estes casais a obter filhos do sexo sub-representado nas suas famílias e pode harmonizar e equilibrar os sexos nas suas famílias.
Diagnóstico genético pré-implantação
1) O que é o diagnóstico/exame genético pré-implantação (PGD/PGS)? O diagnóstico/exame genético pré-implantação é o teste de embriões até ao 3º ou 5º dia de desenvolvimento para detectar anomalias no número e estrutura dos cromossomas. Os dados do teste ajudarão o médico a seleccionar embriões com número cromossómico normal e estrutura para transferência para a mãe. Actualmente, o método de teste mais avançado é a utilização da tecnologia do chip genético, que analisa todos os 46 cromossomas do embrião para seleccionar embriões com números cromossómicos normais e estruturas para transferência. A utilização deste teste pode melhorar a taxa de gravidez clínica dos pacientes, reduzir o risco de aborto prematuro e reduzir os defeitos de nascença.
2) O que é a aneuploidia e quais são as perturbações comuns associadas? A aneuploidia é a ausência ou adição de um ou mais cromossomas completos e fragmentos parciais de cromossomas a um conjunto cromossómico e é utilizada para descrever anomalias cromossómicas. Um corpo humano saudável tem 23 pares de cromossomas (22 pares de autossomas e 1 par de cromossomas sexuais), perfazendo um total de 46. De facto, mais de 50% dos abortos espontâneos no tratamento de FIV são devidos a aneuploidia. Além disso, a aneuploidia pode levar a nados-mortos, defeitos de nascença, etc. As doenças comuns relacionadas com a aneuploidia incluem a trissomia 21 (estupidez congénita, também conhecida como síndrome de Down), a trissomia 18 e a trissomia 13. A síndrome de Down manifesta-se como retardamento mental e malformações dos cinco sentidos, com uma esperança média de vida de 35 a 50 anos. embriões com trissomia 18 e trissomia 13 têm um desenvolvimento anormal no cérebro, ossos, coração, órgãos reprodutivos e outros tecidos e terão uma elevada taxa de aborto, com recém-nascidos a morrer pouco depois do nascimento.
3) Porque é que a aneuploidia aumenta com a idade da mulher? Cada mulher tem um número fixo de folículos preservados nos seus ovários desde o nascimento. Este número decresce com a idade. Uma mulher saudável produzirá um ovo maduro por mês. No entanto, à medida que envelhece, estes folículos preservados também envelhecem. Durante o processo de diferenciação destes folículos de envelhecimento em ovos maduros, o número de cromossomas pode ser perdido ou aumentado e podem ocorrer anomalias estruturais, resultando em ovos aneuploides. A relação entre a taxa de produção de aneuploidia e a idade é detalhada no quadro abaixo: Idade da mulher Taxa de risco de aneuploidia Embriões recém-nascidos 34 anos e mais novos 21-66% <5% 35-37 anos 44-70% 0,5-1% 38 anos e mais velhos 55-80% 1-20%
4. como é que o diagnóstico/exame genético pré-implantação (PGD/PGS) ajuda os doentes? O rastreio genético pré-implantação envolve o teste de cada embrião individual para o número e estrutura dos 46 cromossomas e a selecção de embriões com número cromossómico normal e estrutura para implantação na mãe. A transferência de embriões com números cromossómicos normais aumentará consideravelmente as taxas de gravidez clínica, reduzirá o risco de aborto prematuro e reduzirá a taxa de nascimento de crianças com doenças relacionadas com a aneuploidia.
5) Quem são os grupos adequados para o diagnóstico/exame genético pré-implantação (PGD/PGS)? Os grupos adequados para o rastreio genético pré-implantação são os seguintes: (1) mulheres >35 anos de idade; (2) casais com ≥3 abortos espontâneos, excluindo factores uterinos ou endócrinos; (3) casais que deram à luz filhos com anomalias cromossómicas; (4) casais com mais de 3 transferências estéreis (incluindo transferências frescas e congeladas); (5) casais com número cromossómico e anomalias estruturais tais como a translocação de Roche, síndrome parcial de Creutzfeldt-Jakob, etc.
6) Porque é necessário rastrear 46 cromossomas? A aneuploidia não está presente em apenas um ou alguns cromossomas fixos, mas pode ocorrer em qualquer um dos cromossomas de todo o conjunto cromossómico. Os métodos de teste convencionais detectarão apenas algumas anomalias comuns e falharão os cromossomas que não forem detectados. Só depois do rastreio de todos os cromossomas é que um embrião normal pode ser seleccionado para implantação na mãe, reduzindo assim grandemente o risco de aborto e defeitos de nascença.
7) O diagnóstico/selecção do património pré-implantação (PGD/PGS) terá algum efeito sobre o embrião? Não. O rastreio genético pré-implantação é realizado em embriões que tenham atingido o 3º ou 5º dia de desenvolvimento e são testados para células únicas (oogénese) ou 3-4 células (blastocisto). Nesta fase, as células de um embrião ainda não se diferenciaram em diferentes tipos de células e são todas totipotentes. Testar uma célula destas células não afectará o desenvolvimento e crescimento do embrião inteiro. O diagnóstico/exame genético pré-implantação (PGD/PGS) tem sido amplamente utilizado na prática clínica no estrangeiro.
8 Quais são as vantagens da tecnologia PGD/PGS no nosso hospital? O Departamento de Genética do nosso hospital foi criado em 1979 e é um dos departamentos centrais do centro de diagnóstico pré-natal e do centro de rastreio de recém-nascidos na província de Shaanxi. Em 2001, o Departamento de Saúde aprovou o registo do “Centro de Diagnóstico Pré-Natal de Shaanxi” e do “Centro de Rastreio do Recém-Nascido de Shaanxi”. Actualmente, o departamento de genética está equipado com equipamento de biologia molecular tal como scanners Agilent, espectrómetros de massa e sequenciadores de genes, e os resultados são analisados por médicos em biologia molecular. O nosso Centro de Fertilidade depende da forte plataforma técnica da nossa Unidade de Genética e utiliza a mais avançada tecnologia de chip genético para o diagnóstico/exame genético pré-implantação, que pode efectivamente melhorar a taxa de gravidez clínica de pacientes com concepção assistida e reduzir a taxa de abortos espontâneos e defeitos de nascença.
9) Como é realizada a FIV-PGS? Para PGS, a parte inicial do ciclo de FIV é a mesma e todas incluem os três passos principais seguintes: ・ Tratamento ultra-ovulatório ・ Recuperação de ovos ・ Inseminação de ovos e esperma para obtenção de embriões O método mais comum actualmente é a biopsia dos embriões no terceiro dia após a inseminação dos óvulos. O embriologista removerá uma célula de cada embrião multi-celular (6-8 células) separadamente. Prepararão as células da biópsia, que contêm cromossomas representativos do embrião, de uma forma especial; serão então enviadas para o laboratório genético. No futuro, para o processo de congelamento de embriões, a maioria das biópsias será realizada no quinto dia (biópsia do trofoblastocisto ectoderme) ao mesmo tempo que o congelamento e a transferência do embrião. Se a biopsia for feita no dia 3, embriões sem anomalias cromossómicas estarão prontos para serem transferidos para o útero da paciente do sexo feminino no dia 5. Outros embriões normais, que estão em grande parte maduros ao 5º ou 6º dia, podem ser congelados (criopreservados) para utilização futura. Uma técnica mais inovadora chamada “biopsia trofoblasto” permite obter algumas células a partir dos sacos embrionários do quinto dia e é, portanto, mais precisa. A utilização desta técnica para transferir um único embrião com embriões cromossómicos normais tem uma probabilidade muito elevada de um nascimento saudável e seguro, enquanto a probabilidade de gémeos é muito baixa.
10) Qual é a alternativa ao IVF-PGS? A alternativa à FIV-PGS é um casal conceber naturalmente ou através de tratamentos convencionais de fertilidade, ou o diagnóstico pré-natal pode ser feito utilizando técnicas de diagnóstico molecular semelhantes através de vilosidades coriónicas (CVS) ou amniocentese. A utilização destes métodos requer a recolha de mais amostras durante a gravidez e a comunicação dos resultados dos testes é mais demorada. Ainda há um risco de diagnóstico errado com isto, mas é menos provável do que o PGS. No entanto, neste momento, as únicas opções para o casal são ter um filho com o defeito ou interromper a gravidez.