As etapas envolvidas na FIV variam um pouco em função das circunstâncias particulares do paciente. Pode ser tão simples como a fertilização in vitro e a transferência de embriões, ou pode ser a fertilização in vitro mais outras técnicas de reprodução assistida, tais como a inseminação microscópica, eclosão assistida, métodos cirúrgicos de recuperação de esperma, maturação in vitro dos óvulos, congelamento de óvulos/esperma/embrião, e diagnóstico pré-implantação. As etapas básicas da FIV são: produção de vários óvulos pela mulher, remoção dos óvulos dos ovários e do esperma do homem, fertilização do esperma e dos óvulos no laboratório de FIV, cultura in vitro dos óvulos fertilizados a fim de seleccionar bons embriões para transferência, transferência dos embriões para o útero da paciente, apoio à gravidez após a transferência do embrião, testes de gravidez após a transferência do embrião, dias pós-gravidez fetal e determinação da implantação do embrião O procedimento é baseado nos seguintes princípios Os seguintes passos e procedimentos estão envolvidos na FIV: (1) Processamento de pré-inseminação e monitorização da ovulação: A fim de recolher os oócitos pré-ovulatórios maduros ou quase maduros dos ovários no momento certo, é extremamente importante monitorizar com precisão o progresso da maturação dos folículos antes da ovulação. Muitas vezes apenas um oócito pode ser recuperado usando o ciclo menstrual natural para a recolha de ovos. Para aumentar as hipóteses de sucesso e aumentar o número de folículos em desenvolvimento para obter múltiplos ovos, os ciclos estimulados (também conhecidos como superovulação) são agora comummente utilizados para obter mais de três oócitos de cada vez. ① Monitorização pré-ovulatória durante o ciclo menstrual natural: o primeiro caso de FIV bem sucedido do mundo foi conseguido utilizando a monitorização do ciclo natural para a ovulação. O dia da ovulação é determinado pela temperatura corporal basal, medições endócrinas (valores de estradiol sanguíneo, valores de hormona luteinizante urinária) e monitorização por ultra-sons, juntamente com observações clínicas (alterações no muco cervical, etc.). (ii) Monitorização por ultra-sons: esta deve ser estreitamente coordenada com medições endócrinas. (iii) Promoção da ovulação: existem actualmente quatro regimes principais para a promoção da ovulação: gonadotropina clomifena humana pós-menopausa (HMG)- gonadotropina coriónica (HCG); HMG-HCG; hormona folicular estimulante (FSH)-HCG; gonadotropina O regime Clomiphene-HMG-HCG é usado rotineiramente. (2) Colheita de ovos: Colher ovos num momento determinado. Estão disponíveis os seguintes métodos de recolha de ovos: (1) aspiração visual directa dos folículos sob cesarianas. (2) Recuperação trans-laparoscópica de ovos. (3) Parede transabdominal guiada por ultra-sons, bexiga urinária ou punção vaginal. Actualmente, a recuperação de ovos trans-laparoscópica ou guiada por ultra-sons transvaginais é mais comummente utilizada, sendo esta última particularmente conveniente. (3) Cultura de oócitos: Imediatamente após a aspiração do líquido folicular, os ovos são procurados. Após os oócitos serem removidos, são colocados num prato de cultura contendo líquido de cultura artificial e uma certa quantidade de líquido folicular para ajudar o crescimento e desenvolvimento dos oócitos. O tempo de incubação depende da maturidade dos folículos tomados, e os maduros são geralmente incubados durante 2-6 horas. (4) Fertilização in vitro: o sémen é colhido e lavado para permitir a sua utilização in vitro, depois colocado num meio de cultura contendo oócitos e incubado durante 15-24 horas. Quando se observa que o óvulo fertilizado foi dividido em 4-8 células ao microscópio, pode ser considerado para transferência de embriões. (5) Transferência embrionária: A vagina e o colo do útero são limpos com soro fisiológico e depois esfregados com líquido de cultura, e um cateter de metal ou plástico é colocado no canal cervical. Outro assistente utiliza um tubo de PTFE de 1,3mm para aspirar as células embrionárias do líquido de cultura sob o microscópio mais 0,03~0,05ml de líquido de cultura ou 0,03~0,05ml do soro do sujeito. Após a transferência do embrião, o embrião é colocado na cama durante 24 horas, a actividade é restringida durante 3 a 4 dias e é administrada progesterona. Uma medição beta-GCG é feita 2 semanas após a transferência e a progesterona é descontinuada se não houver gravidez. As gravidezes com transferência bem sucedida são monitorizadas como gravidezes de alto risco.