Para saber clinicamente se uma pessoa é alérgica à penicilina, é necessário tomar primeiro um historial médico. Se houver um historial anterior de alergia a muitos alimentos ou medicamentos, pode haver uma alergia à penicilina. Se não houver história óbvia de cefalosporina ou alergia à penicilina, pode ser feita mais determinação neste ponto através de um teste cutâneo, que envolve tomar uma pequena quantidade de solução de penicilina e injectá-la no corpo e observar reacções imunitárias tais como vermelhidão, inchaço e nódulos duros. Se o teste cutâneo for positivo, isto irá então indicar uma alergia à penicilina. Se o teste cutâneo for negativo, o tratamento com penicilina pode ser continuado, mas não há 100% de garantia de que não será alérgico à penicilina quando esta for administrada, pelo que é importante monitorizar em conformidade. Se não houver alergia significativa, como aperto no peito, erupção cutânea ou comichão na altura da injecção ou durante um período de tempo depois, então não há alergia à penicilina.