Infiltração, moléculas relacionadas com metástases
1. factor de crescimento epidérmico
O factor de crescimento epidérmico (EGFR) é um peptídeo que regula o crescimento celular e tem actividade de tirosina quinase. O receptor EGFR é uma fosfoglicoproteína com um peso molecular de 170 kD, incorporado na membrana celular, e é o produto de expressão do proto-oncogene C-erbB-1. O estudo de Steele concluiu que níveis elevados de expressão do receptor EGFR no cancro colorrectal estavam associados a um mau prognóstico. Na China, Wang Lixia et al[121] também relataram que a sobrevivência dos doentes com cancro colorrectal estava negativamente correlacionada com a taxa de expressão de EGFR nos tecidos tumorais, que podia ser usada como um preditor de prognóstico. Embora o anticorpo monoclonal C225, que liga o EGFR de forma competitiva, tenha sido utilizado para tratamento clínico, a importância prognóstica do EGFR também precisa de acumular mais informação.
2. factor de crescimento endotelial vascular
O crescimento e metástase de tumores sólidos requerem neovascularização, e a angiogénese tumoral é regulada pelo factor de crescimento endotelial vascular (VEGF), um novo regulador vascular tumoral recentemente identificado pelas células tumorais.
Num estudo de Takahashi et al [122] sobre o cancro colorrectal, MVC foi significativamente mais elevado naqueles com expressão VEGF positiva do que naqueles com expressão VEGF negativa. Também na extremidade da infiltração do cancro, quanto maior a densidade de microvasos, mais pronunciada a neovascularização, e mais pronunciada a expressão VEGF, mostrando a consistência da expressão VEGF com o local da neovascularização, indicando que a expressão VEGF está associada ao crescimento infiltrativo. Estudos demonstraram que os pacientes com expressão VEGF-positiva de cancro colorrectal têm um prognóstico significativamente pior do que aqueles com expressão VEGF-negativa, reflectindo a biologia do cancro colorrectal e sendo um indicador de prognóstico significativo [123, 124]. O Avastin, um fármaco alvo molecular para ele, já se encontra em uso clínico.
3. densidade microvascular (DVM)
A MVD está associada à infiltração linfovascular em torno do tumor e pode prever microvasos de alta densidade aumentando o derrame de células tumorais e a metástase para locais distantes através de vasos periféricos e vasos linfáticos. O estado dos gânglios linfáticos cirurgicamente ressecados no cancro colorrectal tem sido sempre o seu factor prognóstico mais importante. Contudo, a presença ou ausência de metástases linfonodais por si só não explica completamente a variação no prognóstico do cancro colorrectal; de facto, aproximadamente 25% dos doentes com gânglios linfáticos negativos ainda irão desenvolver recorrência ou metástases. Os gânglios linfáticos negativos ou positivos não avaliam com precisão o risco de recidiva ou metástase após a cirurgia do cancro colorrectal. O MVD foi recentemente reportado como um indicador prognóstico no cancro colorrectal [125, 126]. Na fase inicial do cancro colorrectal com gânglios linfáticos negativos, a MVD pode ser utilizada para seleccionar pacientes com potenciais metástases ou alto risco de metástases para terapia adjuvante sistémica pós-operatória que os possa beneficiar.
4. metaloproteinases e inibidores Matrix
As metaloproteinases matriciais (MMPS) são um grupo de enzimas de decomposição matricial que desempenham um papel importante na infiltração de tumores e metástases, e as TIMPS são um grupo de quatro inibidores de metástases, nomeadamente TIMP1, TIMP2, TIMP3 e TIMP4. A MMP-1 (colagenase) estava presente nas células tumorais, e os doentes positivos tendiam a ter um prognóstico fraco e não estavam associados ao estádio. Os doentes com proteína MMP-9 tumoral positiva têm tido um prognóstico mais pobre, também independente do estádio [128, 129]. Um estudo doméstico [130] concluiu que a expressão de MMP-2 estava positivamente correlacionada com metástases dos gânglios linfáticos e metástases de órgãos distantes, consistente com o estudo de Baker et al [131].
5. activador e inibidor do fibrinogénio do tipo urokinase-tipo
O activador de inogénio de plasma do tipo urokinase (uPA) é uma protease serina que catalisa a conversão do fibrinogénio em fibrina, que por sua vez degrada uma variedade de componentes de matriz extracelular, e também promove a activação do MMP-2, que é combatida pela inibição do activador de fibrinogénio (PAI), outra classe de inibidor de metástases. Acredita-se geralmente que quanto mais células uPA imunohistoquímicas positivas num tumor, pior é o prognóstico; níveis elevados de PA I-2 estão associados a um bom prognóstico.
6. e-calcineurina
A E-cadherin é uma molécula de adesão dependente de Ca2+ que medeia a adesão célula a célula. A E-cadherin é uma proteína transmembrana cuja parte citoplasmática interage com as proteínas intracelulares, especialmente a β-catenin, para manter a função celular normal. A perda de E-calcineurina e o aumento da infiltração de células tumorais é uma das primeiras alterações no cancro colorrectal. Acredita-se sobretudo que a baixa expressão de E-calcineurina está associada a um mau prognóstico [103, 130].
7. nm23
Um gene supressor da metástase tumoral, localizado em 17q21.3, codifica a difosfato quinase de nucleosídeos humanos (NDPK). a expressão normal do gene nm 23 não só inibe a infiltração de células tumorais e a metástase, mas também inibe indirectamente a formação de tumores; a perda ou mutação do alelo nm 23 está associada à metástase do cancro colorrectal. yamaguch et al [132] citaram que o gene nm 23 A expressão anormal do gene nm23 está intimamente relacionada com a metástase colorrectal in situ. Na China, Qin Zike et al[133] relataram que à medida que a expressão da proteína nm23 diminuiu nos doentes com cancro colorrectal, as células tumorais continuaram a deteriorar-se e a causar infiltração e metástase, e o prognóstico era correspondentemente pobre.
Expressão do antigénio das células cancerígenas
1. antígeno carcinoembrionário (CEA)
Entre os antigénios expressos em cancro colorrectal, o CEA é o mais claramente estudado. Existem quatro formas de distribuição de CEA no tecido canceroso detectado por métodos imunohistoquímicos: ① tipo A, CEA é distribuído na superfície das células cancerosas; ② tipo C1, CEA é distribuído no citoplasma com polaridade celular; ③ tipo C2, difusamente distribuído no citoplasma, independentemente da polaridade celular; ④ tipo S, CEA está localizado no estroma que envolve as células cancerosas. Alguns autores também se referem ao tipo A como o tipo de aro luminal, o tipo C1 como o tipo citoplasmático, e os tipos C2 e S como o tipo difuso. Em tecidos cancerosos altamente diferenciados e moderadamente diferenciados, predominam os tipos A e C1. O tipo C2 correlaciona-se com o grau de diferenciação moderada, enquanto os cancros moderadamente diferenciados e pouco diferenciados, especialmente aqueles com baixa diferenciação, são dominados pelo tipo S. Embora exista um cruzamento sob a forma de distribuição CEA em tecidos cancerígenos com diferentes graus de diferenciação, o local de distribuição da CEA está estreitamente relacionado com o grau de diferenciação das células cancerígenas.
Acredita-se geralmente que o modo e a intensidade da expressão CEA é um indicador importante da biologia clínica do cancro colorrectal: quanto mais forte for a expressão CEA e mais difuso for o modo de distribuição, menor será a diferenciação patológica, mais profunda será a infiltração na parede intestinal, maior será a taxa de metástase dos gânglios linfáticos e a recorrência de metástases após a cirurgia, menor será o período de sobrevivência e pior será o prognóstico. A CEA pré-operatória positiva do sangue e a expressão CEA difusa forte positiva do tecido indicam um pior prognóstico e devem ser seguidas com terapia adjuvante.
A expressão da CEA correlaciona-se com o estádio Dukes e a ploidia de ADN do núcleo. A expressão da CEA nos tecidos de cancro aneuplóide é significativamente mais elevada do que a dos tecidos de cancro diplóide, especialmente nos estádios Dukes C e D, o que reflecte a correlação entre a CEA e o prognóstico.
2. antigénios do grupo sanguíneo
Muitos estudos confirmaram a falta de expressão dos antigénios do grupo sanguíneo ABH no cólon distal e na mucosa rectal, enquanto que estes antigénios estão presentes em tumores nestes locais.os antigénios ABH estão presentes em pólipos neoplásicos (adenocarcinoma) em vez de pólipos hiperplásicos. Muitos dos antigénios associados a tumores identificados por anticorpos monoclonais são glicolípidos de grupo sanguíneo variante e os antigénios Lewis variante representam outro grupo de antigénios embrionários associados ao cancro colorrectal.
3. antigénios monoclonais marcados com anticorpos
Koprowski et al. descobriram o anticorpo monoclonal 17-lA. A entrada deste anticorpo causou imunossupressão do crescimento celular. Johnson et al. aplicaram o anticorpo monoclonal B72.3 para descobrir uma glicoproteína macromolecular (TAG-72). Embora este antigénio seja expresso em 85% dos cancros colorrectais, ainda existe uma considerável variação na expressão em focos primários, gânglios linfáticos e metástases distantes.
4. antigénio Tn
A mucina secretada pelo epitélio normal da mucosa intestinal e os seus tumores é uma glicoproteína molecular elevada com diversas cadeias de hidratos de carbono, estas cadeias de oligossacarídeos variam em comprimento mas estão todas ligadas à serina ou à trionina do polipeptídeo da mucosa, formando uma estrutura GaINAc – O-Serlthr chamada antigénio Tn. o antigénio Tn é ainda mais glicosilado pela adição de moléculas específicas de açúcar sob o controlo de glicosiltransferases, e depois é adicionado ácido salivar para formar Itzkowitz relatou [134] que 87,5% dos cancros colorrectais expressavam o antigénio Sialosyl-Tn e não eram afectados pela idade, sexo, raça, local de ocorrência As taxas de sobrevivência de 5 anos para o antigénio Sialosyl-Tn negativo e positivo foram de 100% e 73%, respectivamente (P < 0,05), independentemente da idade, sexo, raça, local de ocorrência, estádio de Dukes, profundidade de infiltração, grau de diferenciação e ploidia. A análise de regressão múltipla mostrou que a expressão do antigénio Sialosyl-Tn e a ploidia tumoral foram os dois preditores mais importantes da recorrência e do prognóstico. Portanto, o antigénio Sialosyl-Tn foi considerado como um preditor independente do prognóstico em doentes com cancro colorrectal.
Actividade telomerase
A actividade da telomerase e as alterações do comprimento da telomerase têm sido amplamente utilizadas clinicamente no diagnóstico e estimativa do prognóstico de várias neoplasias malignas. tatsumoto et al [135] observaram actividade e comprimento da telomerase em 100 espécimes de cancro colorrectal e 100 espécimes de mucosa do cólon com lesões não cancerosas, acompanhadas durante 3 anos após a cirurgia. 96 das 100 espécimes de cancro colorrectal tinham actividade da telomerase. Como a actividade telomerase mensurável também estava presente em amostras de mucosa cólica de lesões não cancerosas, os níveis de actividade telomerase foram divididos em três grupos, sendo o grupo de actividade alta 50 vezes maior do que o grupo de lesão não cancerosa; o grupo de actividade moderada 10-50 vezes maior; e o grupo de actividade baixa sendo menos de 10 vezes maior do que o grupo não canceroso. Dos 100 tecidos cancerígenos, 28 mostraram uma actividade moderada e 44 mostraram uma actividade elevada. Os pacientes com alta actividade telomerase tiveram um prognóstico significativamente pior do que os grupos de actividade moderada e baixa. A sobrevivência sem doença foi também significativamente inferior em pacientes com actividade telomerase elevada em 87 pacientes submetidos a cirurgia radical, apoiando a possibilidade de a actividade telomerase poder ser um dos indicadores prognósticos independentes para pacientes com cancro colorrectal.
Shoji [136] testou a actividade da telomerase (TA) em 30 espécimes de cancro colorrectal e 30 espécimes de mucosa colorrectal normal correspondente. O índice telomerase é expresso como TI, que é definido como TI = log(A-B). a representa a actividade telomerase no tecido canceroso e b representa a actividade telomerase na mucosa normal, que é significativamente mais elevada no tecido canceroso do que na mucosa normal. ti está intimamente relacionada com a profundidade da invasão tumoral, mas não com a idade, sexo, tipo de tecido, localização, metástase linfonodal, infiltração linfática ou estádio de Dukes. Não houve correlação. Havia uma diferença significativa entre TI com e sem invasão venosa. 4 em cada 5 casos de metástases hepáticas tinham TI elevada, sugerindo que TI elevada pode ser um factor de risco para metástases hepáticas de cancro colorrectal.
Instabilidade dos microssatélites
A instabilidade do microssatélite (MSI) está associada a mutações ou perda do gene MMR. O MSI está associado a quase todos os cancros colorrectais hereditários não-polipose (HNPCC) e a 13% dos cancros colorrectais esporádicos [137]. Relativamente, os cancros colorrectais MSI(+) são mais susceptíveis de ocorrer no cólon proximal, têm mais mucosas, patologia pouco diferenciada, mas têm frequentemente expressão p53 do tipo selvagem e um melhor prognóstico [138]. gryfe et al[139] estudaram 607 doentes com cancro colorrectal e sugeriram que, embora MSI(+) esteja associado a um tipo patológico de baixo grau, pode sugerir um melhor prognóstico independentemente de outros indicadores de prognóstico e reduzir linfonodo e risco de metástase distante, com taxas de sobrevivência de 5 anos de 76% e 54% para MSI(+) versus MSI(-), respectivamente. A sensibilidade do MSI(+) cancro colorrectal avançado à quimioterapia irinoteca foi relatada, sugerindo o valor do MSI na determinação do prognóstico do cancro colorrectal [140].
Survivin
Survivin é uma proteína de apoptose de inibição recentemente identificada (IAP) com um gene de 15 kb localizado a 17q 25, contendo quatro exões e três intrões, e codificando uma proteína de 142 aminoácidos, que é o gene mais estudado na família das IAPs humanas. Não expresso em tecidos maduros normais, Survivin é amplamente expresso nos tumores humanos mais comuns, incluindo cancro do fígado, pulmão, cólon, pâncreas, próstata e mama. Tem sido sugerido que a alta expressão de Survivin está associada à recorrência e metástase do cancro colorrectal, e o seu estatuto de expressão é um factor de prognóstico independente após a cirurgia radical para o cancro colorrectal, fornecendo um valioso indicador de prognóstico para pacientes com cancro colorrectal [141-143]. Entretanto, se inibir a expressão ou função de sobrevivência nas células tumorais pode induzir apoptose espontânea das células tumorais [144]. Está actualmente a ser realizada investigação para rastrear inibidores eficazes de Survivin, tais como oligonucleótidos antisensos que visam Survivin, interferidores de RNA e alguns pequenos compostos de moléculas, que podem aumentar a sensibilidade quimioterapêutica ao matar células tumorais e também aumentar a eficácia dos medicamentos quimioterapêuticos [145]. Survivin pode ser um alvo ideal de terapia genética e imunoterapia para o cancro colorrectal. alvos moleculares.